【摘 要】
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[目的] 建立高效的病原菌原生质体制备和再生体系,明确甜瓜蔓枯病菌的致病机理.[方法] 采用单因素分析法,利用2种混合酶20 g·L-1 Driselase和8 g·L-1 Lysing enzymes,以不
【机 构】
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新疆农业科学院哈密瓜研究中心,新疆 乌鲁木齐 830091
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[目的] 建立高效的病原菌原生质体制备和再生体系,明确甜瓜蔓枯病菌的致病机理.[方法] 采用单因素分析法,利用2种混合酶20 g·L-1 Driselase和8 g·L-1 Lysing enzymes,以不同菌龄、摇培转速、不同酶解时间、温度、渗透压稳定剂的种类及pH、再生培养基为研究条件;对甜瓜蔓枯病菌原生质体的制备及再生体系进行优化.[结果] 结果表明:以培养36 h左右的菌丝体为材料,以0.7 mol·L-1 NaCl作为渗透压稳定剂(pH=7),用20 g·L-1 Driselase和8 g·L-1 Lysing enzymes在30 ℃、140 r·min-1条件下酶解4 h,原生质体的产量可达9.65×107个·mL-1;以琼脂含量为0.6％的SR培养基作为再生培养基,甜瓜蔓枯病菌的再生率可达22.53％;原生质体的再生率在存放10 h内下降迅速,10 h后下降速度逐渐平缓.[结论] 确定了蔓枯病菌的高效原生质体制备与再生体系,为该菌株遗传转化体系的建立奠定基础.
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