【摘 要】
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利用PCR技术扩增出猪伪狂犬病毒gH基因中187 bp的片段,并克隆到pGEMT载体上,纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩
【机 构】
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河南农业大学牧医工程学院,河南省动物性食品安全重点实验室
【基金项目】
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河南省杰出人才创新基金项目（0621002100）,河南省重点科技攻关项目（08210213007）
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利用PCR技术扩增出猪伪狂犬病毒gH基因中187 bp的片段,并克隆到pGEMT载体上,纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪伪狂犬病毒的荧光定量PCR检测方法.该方法检测灵敏度可达1.26×102拷贝.μL-1,与猪圆环病毒,猪细小病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪瘟病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对15份疑似病料进行了检测,发现均为荧光定量PCR阳性,而常规PCR只能检测出6份阳性.
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