吉西他滨对胰腺癌细胞增殖、凋亡及保罗样激酶-1表达的影响

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目的 观察吉西他滨对胰腺癌细胞增殖、凋亡及保罗样激酶-1(PLK-1)表达的影响.方法 采用不同浓度的吉西他滨处理胰腺癌AsPC-1细胞,在电镜下观察细胞的形态,噻唑蓝(MTT)法测定细胞生长抑制情况;不同浓度(2、5 μmol/L)的吉西他滨处理细胞12、24、48、72 h后,流式细胞分析法检测细胞凋亡,以半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测PLK-1 mRNA及PLK-1蛋白的表达.结果 MTT结果示随吉西他滨浓度增加,细胞增殖率明显下降(P<0.05);流式细胞分析法检测凋亡结果示:处理组凋亡率较空白对照组明显增加(P<0.05);RT-PCR和Western blot检测PLK-1 mRNA及PLK-1蛋白的表达结果显示,不同时间点PLK-1 mRNA相对表达量分别为:对照组0.70 ±0.15、0.65 ±0.27、0.72 ±0.13、0.68±0.30;2 μmnol/L组:0.88 ±0.58、0.95±0.53、2.36±0.57、3.53 ±0.89;5 μmol/L组:0.89 ±0.60、1.02±0.32、3.95±1.84、4.52 ±2.25及PLK-1蛋白的表达水平分别为:对照组:0.82 ±0.41、0.78 ±0.46、1.01 ±0.05、0.88±0.25;2 μmol/L组:0.89±0.28、1.61 ±0.88、1.66 ±0.18、3.28±1.33;5μ.mol/L组:0.85±0.36、1.89±0.18、2.73±0.78、4.32±2.13,也相应升高(P<0.05).结论 吉西他滨能诱导AsPC-1细胞凋亡,其机制可能与细胞内的PLK-1水平改变有关.PLK-1基因表达水平与胰腺癌化疗药物敏感性密切相关。

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