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目的:克隆小鼠pdx-1基因,构建其真核表达载体,并在小鼠胚胎干细胞中表达,为糖尿病的细胞移植治疗奠定基础。方法:PCR扩增小鼠胰腺pdx-1基因eDNA,酶切后和携带绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pEGFP—N1重组,将pdx-1基因eDNA片段连接到pEGFP—N1载体的多克隆位点,形成重组载体pEGFP/pdx-1,转化大肠杆菌DH50t菌株,构建成pdx-1基因真核表达载体质粒。扩增DH50t后抽提质粒DNA,HindⅢ和BamHⅠ酶切,电泳,DNA测序鉴定。鉴定正确的质粒DNA用脂质体包裹后