疯牛病和羊痒病Western blotting检测方法的建立

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chengyfei
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以朊蛋白单抗AH6和碱性磷酸酶标记的马抗鼠酶标二抗建立了疯牛病和羊痒病的Western blotting检测方法。对Western blotting各种反应条件进行摸索。并确定了最佳工作条件,结果表明:匀浆缓冲液为RIPA时的最佳反应条件包括浓缩胶电泳电压为恒压90V,分离胶电泳电压为恒压160V,转印的最佳电压和时间为恒压100V1.5h;封闭液为3%BSA时,封闭15min,封闭效果最好;AH6的最佳稀释度为1:4000。4℃下孵育过夜。马抗鼠二抗的最佳稀释度1:1000,室温下孵育30min。采用已
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