【摘 要】
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目的 研究THP-1细胞转化的巨噬细胞中Notch信号通路成分对氧化性低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)作用下的应答变化,以及Toll样受体2小分子干扰RNA(to
【机 构】
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430070湖北武汉,中部战区总医院心血管内科
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目的 研究THP-1细胞转化的巨噬细胞中Notch信号通路成分对氧化性低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)作用下的应答变化,以及Toll样受体2小分子干扰RNA(toll like receptor 2 small interfering RNA,TLR2siRNA)对该应答的作用,为了解Notch信号在炎症反应及参与动脉硬化机制提供实验依据.方法 将贴壁的THP-1细胞分为3组:①诱导组:采用50 mg/L ox-LDl刺激转化贴壁的THP-1源巨噬细胞;②转染组:采用50 mg/L ox-LDL刺激转化贴壁的THP-1源巨噬细胞+TLR2siRNA转染;③对照组:转化并贴壁的THP-1源巨噬细胞.采用实时定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qPCR)检测Notch信号通路受体、配体的表达,单核细胞趋化蛋白1 (monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1) mRNA,血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesive molecule 1,VCAM-1) mRNA的表达.将TLR2siRNA基因沉默后用Lipo2000转染THP-1源巨噬细胞,在oxLDL作用下,qPCR分别检测TLR2siRNA转染的THP-1源巨噬细胞与未转染的THP-1源巨噬细胞的Notch信号成分及VCAM-1、MCP-1 mRNA表达.结果 与对照组比较,加入ox-LDL后,THP-1源巨噬细胞表达Notch 1、DLL4和Jagged 1表达明显升高(P＜0.05),VCAM-1、MCP-1 mRNA的表达也明显升高(P＜0.05);而接受TLR2siRNA转染后,可部分逆转上述ox-LDL对THP-1源巨噬细胞的致损活化效应.结论 TLR2siRNA可抑制ox-LDL致损THP-1源巨噬细胞Notch信号通路各成分及VCAM-1与MCP-1 mRNA的表达上升.
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