【摘 要】
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目的 观察重组腺相关病毒(rAAV)介导大鼠血红素氧合酶-1(rHO-1)基因转染对心肌缺血再灌注(IR)过程中Toll样受体4(TLR4)表达的影响.方法 构建携带rHO-1基因的rAAV 载体,并转染
【机 构】
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湖北省妇幼保健院麻醉科,武汉大学中南医院麻醉科
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目的 观察重组腺相关病毒(rAAV)介导大鼠血红素氧合酶-1(rHO-1)基因转染对心肌缺血再灌注(IR)过程中Toll样受体4(TLR4)表达的影响.方法 构建携带rHO-1基因的rAAV 载体,并转染大鼠心肌细胞.基因转染后3个月,用逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)检测HO-1mRNA表达.采用结扎左冠状动脉前降支30 min、再灌注120 min建立心肌IR模型.成模后测定心肌梗死面积,光镜下观察心肌组织病理学改变,采用蛋白印迹法( Western blot)检测TLR4、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和核转录因子-κB (NF-κB)的蛋白表达水平.结果 rAAV-rHO-1组HO-1 mRNA表达(1.67±0.32)较IR组(0.82±0.09)增加,差异有统计学意义(P＜0.05),同时心肌梗死面积较IR组减少(P＜0.05)、心肌组织病理学损伤较轻；rAAV-rHO-1组TLR4、TNF-α和NF-κB的蛋白表达量分别为(0.33 ±0.04、0.36±0.02、0.33±0.03),明显低于IR组(0.45 ±0.03、0.42±0.05、0.46±0.07),差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 rAAV介导的rHO-1基因转染大鼠心肌细胞后,通过降低心肌TLR4表达水平,抑制炎症反应,从而减轻心肌IR损伤.
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