【摘 要】
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目的探讨RhoA对血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和微血管生成的影响以及蛋白酶体抑制剂MG132对RhoA调控作用的影响。方法将组成性激活的RhoA的真核表达质
【机 构】
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四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室信号转导及分子靶向治疗研究室; 第四军医大学西京医院肿瘤科;
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.30770823);陕西省自然科学基金(No.2007C222)资助
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目的探讨RhoA对血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和微血管生成的影响以及蛋白酶体抑制剂MG132对RhoA调控作用的影响。方法将组成性激活的RhoA的真核表达质粒,在脂质体介导下转染胃癌细胞系MKN-45,经G418筛选出阳性单克隆并用Western blot检测是否稳定转染成功;应用ELISA检测不同细胞培养上清中VEGF的含量;建立组成性激活RhoA的荷瘤鼠模型,并用MG132治疗并观察治疗效果;用免疫组化染色方法检测RhoA及MG132对肿瘤细胞表达HIF-1α、VEGF及CD31的影响。结果组成性激活RhoA的稳定转染细胞株构建成功;组成性激活的RhoA促进VEGF的分泌,而MG132抑制VEGF的分泌;组成性激活的RhoA促进肿瘤的生长,差异有统计学意义(P<0.05),MG132抑制肿瘤的生长,差异有统计学意义(P<0.01);组成性激活的RhoA促进HIF-1α、VEGF及CD31的表达,MG132抑制HIF-1α、VEGF及CD31的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MG132通过抑制RhoA对HIF-1α、VEGF及CD31的上调来影响肿瘤血管的生成。
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