PRL-3基因RNA干扰慢病毒载体的构建及在SW480细胞中的表达

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目的构建PRL-3基因慢病毒干扰载体及建立PRL.3基因稳定干扰的结直肠癌细胞亚系.为PRL.3基因功能研究奠定基础。方法设计PRL-3基因特异性RNAi靶序列,与pENTR^TM/U6线性载体定向连接,构建pENTR^TM/U6真核入门表达载体。通过与pENTR^TM/U6entryclone与pLenfi6/BLOCK-iTtU-DEST载体进行重组,获得pLenti6/BLOCK-imEST真核表达慢病毒干扰载体。利用包装细胞293Fr获得重组的慢病毒,感染大肠癌细胞株SW480细胞,杀稻瘟菌素筛选
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