【摘 要】
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目的：探讨β-淀粉样蛋白1-42寡聚体（amyloid β-protein 1-42 oligomer,oAβ）对BV2小胶质细胞炎症反应的影响及可能的机制。方法：制备oAβ，采用不同浓度（0、0.5、1、5、10、20μmol/L）的oAβ孵育BV2小胶质细胞24 h后，用倒置相差显微镜观察细胞形态变化；用CCK-8法检测BV2小胶质细胞活力；用ELISA法检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α（t
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（No.81673914）； 2020年武汉市应用基础前沿项目（No.2020020601012302）； 武汉市卫生健康委青年项目（No.WZ21Q08）；
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目的：探讨β-淀粉样蛋白1-42寡聚体（amyloid β-protein 1-42 oligomer,oAβ）对BV2小胶质细胞炎症反应的影响及可能的机制。方法：制备oAβ，采用不同浓度（0、0.5、1、5、10、20μmol/L）的oAβ孵育BV2小胶质细胞24 h后，用倒置相差显微镜观察细胞形态变化；用CCK-8法检测BV2小胶质细胞活力；用ELISA法检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α,TNF-α）、白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）、IL-4和IL-10的分泌水平。随后将BV2小胶质细胞分成对照组、模型组和拮抗剂组，模型组选取浓度为5μmol/L的oAβ处理BV2小胶质细胞，拮抗剂组在模型组基础上加10μmol/L Toll样受体1（Toll-like receptor 1,TLR1）/TLR2拮抗剂CU-CPT22作用于细胞，应用RT-qPCR和Western blot检测3组细胞TLR1、TLR2、髓样分化因子88（myeloid differentiation factor88,MyD88）的mRNA和蛋白表达，用ELISA检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-4和IL-10的分泌水平。结果：BV2小胶质细胞的活力随着oAβ浓度的增加而降低，TNF-α和IL-6分泌水平随oAβ浓度的增加而升高，IL-4和IL-10分泌水平随oAβ浓度的增加而降低，且与0μmol/L oAβ组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。与对照组相比，模型组TLR1、TLR2和MyD88的mRNA及蛋白表达水平均显著升高（P＜0.01）,TNF-α和IL-6分泌水平显著升高（P＜0.01）,IL-4和IL-10分泌水平显著降低（P＜0.01）；与模型组相比，拮抗剂组TLR1、TLR2及MyD88 mRNA和蛋白表达均显著降低（P＜0.05）,TNF-α和IL-6分泌水平显著降低（P＜0.01）,IL-4和IL-10分泌水平无显著变化（P＞0.05）。结论：不同浓度的oAβ刺激BV2小胶质细胞后均出现了炎症反应，且oAβ呈浓度依赖性的升高了促炎细胞因子TNF-α和IL-6的表达水平，降低了抗炎细胞因子IL-4和IL-10的表达水平；oAβ可能通过TLR1/2-MyD88信号通路诱导BV2小胶质细胞活化，进而上调其促炎介质的水平。
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