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目的
观察肿瘤微环境中氧含量对三阴性乳腺癌(TNBC)程序性死亡因子配体1(PD-L1)表达和肿瘤免疫的调控。
方法将1×105个4T1细胞接种至雌性BALB/c小鼠乳腺脂肪垫，28 d后验证TNBC肺转移小鼠模型建立成功。采用流式细胞术比较体外培养4T1细胞和28 d体内4T1细胞表面的PD-L1表达，并比较28 d转移肺与正常肺组织的CD4＋、CD8＋T淋巴细胞和总淋巴细胞比例。采用低氧探针Hypoxyprobe-1和免疫组织化学方法，明确肿瘤组织中的低氧区域。免疫荧光双标记染色法检测Hypoxyprobe-1阳性反应信号为绿色荧光，PD-L1阳性反应信号为红色荧光，两者重叠为黄色荧光。
结果4T1小鼠肺转移模型中，原发灶内细胞PD-L1表达水平较体外培养细胞明显升高(32.55%比3.87%，P＝0.000)；原发肿瘤和转移肺组织中存在不同程度的深层低氧区，高表达PD-L1细胞集中于肿瘤低氧区域；28 d的荷瘤小鼠肺部T细胞、CD4＋ T细胞、CD8＋ T细胞占总白细胞比例较正常小鼠肺明显减少，分别为1.72%比19.61%，P＝0.000；1.15%比15.67%，P＝0.000；0.29%比3.20%，P＝0.001。CD4＋ T细胞、CD8＋ T细胞占总T细胞比例也较正常小鼠肺明显减少，分别为66.56%比79.94%，P＝0.006；16.81%比28.93%，P＝0.000。
结论肿瘤低氧微环境与TNBC肿瘤细胞PD-L1表达升高相关，通过此机制参与了肿瘤T细胞免疫抑制的调节。