【摘 要】
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目的 探讨塞来昔布对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠脊髓中Th1/Th17细胞分化的抑制作用.方法 将36只C57BL/6小鼠随机分为对照组(等体积生理盐水)、模型组(等体积生理盐水)、塞来昔布组(5 mg/kg),各12只.皮下注射髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)混合乳剂以复制EAE小鼠模型.建模成功后,各组小鼠灌胃给予相应药物或生理盐水,每天1次,连续35 d.对小鼠进行神经功能缺损评分;光学显微镜下观察小鼠脊髓髓鞘脱失程度;采用流式细胞仪测定小鼠脊髓中CD4+T细胞与
【机 构】
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新疆维吾尔自治区人民医院,新疆 乌鲁木齐 830001;新疆维吾尔自治区人民医院,新疆 乌鲁木齐 830001;新疆维吾尔自治区临床药学研究所,新疆 乌鲁木齐 830001
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目的 探讨塞来昔布对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠脊髓中Th1/Th17细胞分化的抑制作用.方法 将36只C57BL/6小鼠随机分为对照组(等体积生理盐水)、模型组(等体积生理盐水)、塞来昔布组(5 mg/kg),各12只.皮下注射髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)混合乳剂以复制EAE小鼠模型.建模成功后,各组小鼠灌胃给予相应药物或生理盐水,每天1次,连续35 d.对小鼠进行神经功能缺损评分;光学显微镜下观察小鼠脊髓髓鞘脱失程度;采用流式细胞仪测定小鼠脊髓中CD4+T细胞与CD8+T细胞占比,分析CD4+T细胞的分化程度;采用酶联免疫吸附法测定小鼠脊髓中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平;采用Western blot法测定小鼠脊髓中环氧合酶2(COX-2)、核因子κB(NF-κB)、含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)蛋白表达水平.结果 与模型组比较,塞来昔布组小鼠同时间点神经功能缺损评分显著降低,小鼠脊髓中CD4+T细胞占比,CD4+T细胞中Th1与Th17细胞占比,TNF-α,IL-6,IL-1β水平,以及COX-2,p-NF-κB,NLRP3蛋白表达水平均显著降低(P<0.05).模型组小鼠脊髓髓鞘脱失严重,塞来昔布组虽可见部分髓鞘破坏,但整体染色更深,且髓鞘空泡区域较少.结论 塞来昔布可在一定程度上改善模型小鼠EAE症状,其机制可能与抑制COX-2活性,减少CD4+T细胞向Th1与Th17亚型分化,降低TNF-α,IL-6,IL-1β等炎性细胞因子水平有关.
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