携带oct4、klf4s、ox2、nanog4种转录因子的腺病毒载体的构建

来源 :浙江理工大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：guofy

【摘要】

：

构建并鉴定携带人oct4、klf4、sox2、nanog4个基因的腺病毒载体,重组出能同时表达这4种转录因子的腺病毒,为进一步诱导多能干细胞的研究提供新方法。使用口蹄疫病毒2A序列将

【作者】

：

张茜真钱其军

【机构】

：

浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所

【出处】

：

浙江理工大学学报

【发表日期】

：

2010年6期

【关键词】

：

诱导多能干细胞转录因子腺病毒载体 induced pluripotent stem cell transcription factors adenovi

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构建并鉴定携带人oct4、klf4、sox2、nanog4个基因的腺病毒载体,重组出能同时表达这4种转录因子的腺病毒,为进一步诱导多能干细胞的研究提供新方法。使用口蹄疫病毒2A序列将人的oct4、klf4、sox2、nanog4个基因顺序连接,定向克隆至腺病毒载体pDC328上,并在nanog下游插入红色荧光蛋白dsRed2作为报告基因。利用酶切及PCR方法鉴定病毒载体的正确性;荧光显微镜下观察病毒感染HEK 293细胞24 h后红色荧光的表达,检测病毒功能;实时定量PCR检测细胞内4种基因的表达情况。结

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