【摘 要】
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目的建立检测CYP3A5基因rs776746位点单核苷酸多态性(SNP)的Taqman-MGB实时荧光聚合酶链反应(PCR),并分析该位点对他克莫司药物代谢的影响。方法针对CYP3A5基因rs776746位点
【机 构】
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上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科,上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科、肾脏移植中心
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目的建立检测CYP3A5基因rs776746位点单核苷酸多态性(SNP)的Taqman-MGB实时荧光聚合酶链反应(PCR),并分析该位点对他克莫司药物代谢的影响。方法针对CYP3A5基因rs776746位点设计相应引物及双标记探针,建立并评价检测该位点SNP的Taqman-MGB实时荧光PCR;收集170例服用他克莫司患者的全血DNA样本,用建立的Taqman-MGB实时荧光PCR检测CYP3A5基因型,并分析不同CYP3A5基因型与他克莫司血药浓度剂量比的相关性。结果建立的Taqman-MGB基因分析法能够对CYP3A5 rs776746位点基因型进行高效区分,可检测最低含量为0.01 ng水平的DNA样本,并且具有较好的重复性和特异性,其检测结果与测序结果完全一致。170例患者中CYP3A5*1/*1型18例(10.59%)、CYP3A5*1/*3型65例(38.24%)、CYP3A5*3/*3型87例(51.18%);其中104例异体肾移植患者3种基因型的血药浓度剂量比分别为(52.47±35.96)、(77.79±33.80)、(134.80±79.35)(ng/m L)/(mg·kg-1·d-1),各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论建立了一种敏感性高、特异性好、重复性佳、适用于临床快速检测CYP3A5 rs776746 SNP位点的Taqman-MGB方法。初步分析显示CYP3A5*3基因型的存在会减弱患者对他克莫司的代谢能力。
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