【摘 要】
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将实验室克隆得到的E.coli BL21/p ET28a-bgaB-18重组菌株在IPTG的诱导下进行表达,对其表达的β-半乳糖苷酶性质进行研究.首先,通过离心收取重组菌菌体;其次,通过超声破碎菌
【机 构】
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遵义医药高等专科学校基础教学部,昆明理工大学生命科学与技术学院
【基金项目】
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遵市科合HZ字(2019)198,遵市科合HZ字(2019)207
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将实验室克隆得到的E.coli BL21/p ET28a-bgaB-18重组菌株在IPTG的诱导下进行表达,对其表达的β-半乳糖苷酶性质进行研究.首先,通过离心收取重组菌菌体;其次,通过超声破碎菌体细胞,再用镍柱对重组蛋白质进行亲和层析;最后,收集层析液,再利用紫外分光光度计测定重组β-半乳糖苷酶活性,并研究其酶学性质.结果表明:该酶的最适反应温度为37℃,最适pH值为7.5;在温度30~50℃、pH 6.0~8.0范围内酶稳定性较好;Mg^2+、Mn^2+为其激活剂,Cu^2+为其抑制剂;测得K m=0
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