【摘 要】
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目的 通过S期激酶相关蛋白(SKP2)反义寡核苷酸(ASODN)阻断泛素-蛋白酶体降解途径,观察对胆管癌细胞QBC中SKP2和p27kip1表达的影响,探讨泛素-蛋白酶体途径在胆管癌发生发展中的作用.方法 SKP2反义寡核苷酸和胆管癌细胞QBC共培养,脂质体转染,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),Western blot法检测SKP2和p27kip1 mRNA和蛋白在QBC中的表达.结果 SK
【机 构】
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430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院普外科,南方医科大学附属南方医院普外科,南方医科大学附属南方医院普外科,430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院普外科,430030
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目的 通过S期激酶相关蛋白(SKP2)反义寡核苷酸(ASODN)阻断泛素-蛋白酶体降解途径,观察对胆管癌细胞QBC中SKP2和p27kip1表达的影响,探讨泛素-蛋白酶体途径在胆管癌发生发展中的作用.方法 SKP2反义寡核苷酸和胆管癌细胞QBC共培养,脂质体转染,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),Western blot法检测SKP2和p27kip1 mRNA和蛋白在QBC中的表达.结果 SKP2 ASODN作用于QBC后,SKP2在mRNA和蛋白的表达较对照组和NSODN组均显著降低(P＜0.05),p27kip1 mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05),蛋白表达则较对照组和NSODN组明显增高(P＜0.05).结论 SKP2介导的泛素-蛋白酶体途径在调节胆管癌细胞QBC中p27kip1的降解中发挥重要作用,SKP2反义寡核苷酸在显著抑制QBC中SKP2 mRNA和蛋白的表达的同时,促进p27kip1蛋白表达,但对p27kip1 mRNA无明显影响,提示SKP2对p27kip1的调节主要在转录后水平.SKP2作为胆管癌基因治疗中有效的潜在靶基因,在胆管癌的基因治疗方面具有重要意义。
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