紫花苜蓿MsNAP启动子克隆及转基因分析

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启动子位于基因上游,起着调控基因转录的作用,是研究基因表达特征和功能的重要元件.为了研究MsNAP启动子活性,探究MsNAP基因功能,进而研究高产优质的紫花苜蓿,造福畜牧业,本试验利用染色体步移法,成功获得了紫花苜蓿MsNAP基因翻译起始位点上游1 390bp序列,通过生物信息学分析,发现该区域存在一个完整的启动子,含有多种顺式作用元件.利用DNA重组技术,成功构建了MsNAP启动子表达载体,通过农杆菌介导技术成功转入到烟草中.选取衰老与未衰老的烟草叶片,进行葡萄糖苷酸酶(glucuronidase,GUS)染色分析,结果显示,在衰老叶片中GUS活性远远高于未衰老叶片,表明MsNAP启动子在衰老的叶片中具有较高的转录调控活性,从而为深入研究MsNAP启动子活性和分析MsNAP基因的功能提供了基础.
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