【摘 要】
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目的 通过建立动脉粥样硬化损伤部位细胞模型,观察ApoAⅠ对THP-1源性泡沫细胞 ApoE分泌的影响,探讨ApoAⅠ与ApoE之间是否存在相互关系以及这种关系对动脉粥样硬化的影响.方法
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目的 通过建立动脉粥样硬化损伤部位细胞模型,观察ApoAⅠ对THP-1源性泡沫细胞 ApoE分泌的影响,探讨ApoAⅠ与ApoE之间是否存在相互关系以及这种关系对动脉粥样硬化的影响.方法 采用聚乙二醇-6000(PEG-6000)沉淀法制备人血浆HDL,再利用凝胶过滤柱层析法分离ApoAⅠ;佛波酯(PMA)诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)使分化后THP-1细胞荷脂,建立动脉粥样硬化细胞模型;ELISA检测不同浓度ApoAⅠ(0,5,10,15,25 μg/ml)及不同孵育时间(0,3,6,12,24 h),THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌;RT-PCR检测细胞ApoE mRNA的表达情况.结果 ApoAⅠ增加THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌量;且ApoE蛋白质的分泌随着ApoAⅠ孵育时间增加而增加,在24 h ApoE的分泌量达最大;在剂量试验中,ApoE的分泌量随着ApoAⅠ剂量的增加有增加趋势,ApoAⅠ浓度为25 μmol/L时,ApoE分泌量最大;而ApoE基因的表达不受ApoAⅠ的影响.结论 一定浓度的ApoAⅠ促进THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌,且具有时间及剂量依赖性.而在基因水平上,ApoAⅠ对ApoE mRNA表达没有影响.
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