【摘 要】
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目的通过载体表达的RNA干扰技术（RNAi）阻断小鼠膀胱癌T739细胞TLR2基因的表达,建立TLR2基因稳定沉默的细胞株。方法构建3种pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR-TLR2重组质粒,脂质体法转染T
【机 构】
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广州中医药大学第二临床医学院中心实验室
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目的通过载体表达的RNA干扰技术（RNAi）阻断小鼠膀胱癌T739细胞TLR2基因的表达,建立TLR2基因稳定沉默的细胞株。方法构建3种pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR-TLR2重组质粒,脂质体法转染T739细胞,用RT-PCR法筛选干扰效果最强的重组质粒。再将该重组质粒转染T739细胞,用杀稻瘟菌素筛选抗性细胞克隆,即获得TLR2受体及其mRNA稳定表达最低的稳转细胞株,并鉴定其生物学特征。结果测序结果显示设计合成的DNA片段已正确插入载体,将沉默效果最强的重组质粒pcDNATM6.2-GW
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