表达黑色素瘤相关抗原D4a重组腺病毒的构建及鉴定

来源 :肿瘤研究与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户:frankyfeng
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 构建表达人黑色素瘤相关抗原D4a(MAGE-D4a)基因的重组腺病毒载体并进行鉴定.方法 从胶质瘤细胞系中用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法得到MAGE-D4a基因全长片段,将其导入T载体进行测序,得到准确的序列后再导入腺病毒穿梭质粒中.将穿梭质粒和病毒骨架通过电穿孔导入细菌内进行重组,挑选阳性克隆,提取重组后的质粒,用脂质体法将其在体外转染入HEK293细胞,并在细胞内部包装.扩增收集重组腺病毒Ad-MAGE-D4a,RT-PCR方法检测其体外表达,并用倍比稀释感染法测定腺病毒的滴度.结果 MAGE-D4a基因被导入带有绿色荧光的腺病毒载体中,PCR检测证实其在转染后的HEK293细胞中表达,病毒滴度为2× 108 pfu/ml.结论 成功构建表达人MAGE-D4a基因的重组腺病毒载体,有效转染HEK293细胞并进行基因表达。

其他文献
近2年来我们采用育阴法治疗鼻衄,疗效确切,现报告如下。rn1 一般资料rn 本组观察20例,其中男性12例,女性8例;年龄最小20岁,最大52岁,平均年龄40.5岁;病程1个月至1 a,平均为6个月。rn2
目的 探讨在高血压护理工作中护患沟通对工作效果的临床影响.方法 选自2017年5月——2018年5月我方医院收治的62例高血压患者.采取随机数字表法均分为两组.观察组31例患者在
今年的1月13日,是汉语拼音之父、著名语言学家周有光先生112岁的生日,我们为之祝福,为之骄傲!谁知刚刚过完生日的第二天(14日)凌晨3点半,周先生就与世长辞,让我们深感意外!虽然,我们深知生命的短暂,就在一呼一吸之间。周先生的一生一死,一喜一悲,一日百年,实乃生命常态。老子有言:“死而不亡者寿”,更何况周先生寿登112岁,学界罕见其人,已可谓荣幸至极!故而,在此传承周先生所开辟的治学与养生之道,
期刊
早就听说贵州山水美,而且美得令人陶醉.对于我们来说,也许只知道黄果树瀑布的壮观、革命圣地遵义,其实贵州的美景实在是太多了,特别是多姿多彩的少数民族风情令人痴迷.去年夏
目的 探究冠心病心绞痛护理中应用协同护理模式的临床效果.方法 选取2017年3月——2018年12月医院收治的98例冠心病心绞痛患者,随机分为2组,49例施行基础性护理,为对照组;49
目的 研究融合基因SYT-SSX1和SYT-SSX2在滑膜肉瘤中的表达及功能.方法 收集原发滑膜肉瘤标本22例及患者临床资料,采用反转录聚合酶链反应法检测SYT-SSX1和SYT-SSX2的表达并统计分析其与病理因素的相关性;应用脂质体将携带SYT-SSX1和SYT-SSX2基因的重组质粒转染到小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和迁移侵袭实验检测SYT-SSX1和SYT-
笔者自1993年以来,运用中药回乳58例,取得了满意的临床效果。现报道如下:rn1 临床资料rn 本组58例中,门诊病人28例,住院30例;年龄最小21岁,最大35岁;足月产后3例,中期引产后5例,哺乳期4
随着我国经济的发展和人民生活水平的不断提高,孕产妇在孕期摄入过度的营养,巨大儿发生率逐年升高,母婴并发症也相应增加。巨大儿进入儿童期后容易发胖,到了成年期,糖尿病、
患者最需要什么?世人定会异口同声地回答:“爱”.rn诚然,医者仁心,核心便是爱.但是,在临床服务中,医者仅有爱是不够的,爱也未必会被应用得相得益彰.鸭绒被里走不出生命的勇士
目的 探究心血管介入导管室围手术期护理中应用精细化护理与临床护理路径的效果.方法 研究对象来自我院2017年8月至2018年8月期间收治的88例心血管介入手术患者.将所有患者随