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[摘要]目的探讨血浆多聚免疫球蛋白受体（PIgR/SC）、甲胎蛋白（AFP）对原发性肝癌（PHC）的诊断价值及联合检测的意义。方法选取50例原发性肝癌患者、30例肝良性占位患者、45例肝硬化患者和60例健康志愿者进行研究，抽取每位研究对象4mL空腹静脉血，采用电化学发光全自动免疫分析系统检测患者血清中的甲胎蛋白（AFP）浓度，采用自行包被的ELISA检测板和OD值半定量法检测血浆PIgR/SC。肝癌患者手术切除后1周重复检测AFP和PIgR/SC水平。结果肝癌、肝良性占位、肝硬化和志愿者4组患者PIgR/SC和AFP水平差异有统计学意义（P<0.05），两两分析，肝癌患者PIgR/SC高于肝良性占位患者、肝硬化患者和志愿者（P<0.05）。PIgR/SC诊断原发性肝细胞肝癌的敏感度为76%高于AFP的66%，特异性为68.9%，低于AFP的81.5%，差异有统计学意义（P<0.05）。联合检测PIgR/SC、AFP可提高肝癌患者的诊断率。PIgR/SC与AFP串联检测诊断肝癌的特异度为95.6%，2项指标并联检测诊断肝癌的灵敏度为92.0%，明显高于单用PIgR/SC或AFP（P<0.05）；结论联合检测PIgR/SC、AFP可显著提高原发性肝癌患者的诊断率。
[关键词]多聚免疫球蛋白受体；甲胎蛋白；原发性肝癌；诊断价值
[中图分类号]R735.7
[文献标识码]A
[文章编号]2095-0616（2016）23-15-04
原发性肝癌（简称肝癌），是我国常见的恶性肿瘤之一，其发病率在世界各地都有增加的趋势，我国的新发病例占了全球肝癌病例的一半以上。肝癌具有恶性程度高、早期诊断率低、预后差、病死率高的特点，因此，肝癌的早期诊断是治疗和延长患者生存期的关键。检测肝癌血清中肿瘤标志物是目前早期诊断的主要手段之一。目前常用的肝癌肿瘤标志物为甲胎蛋白（AFP）。但临床上约有30%肝癌病人AFP无明显升高。而在慢性肝炎和肝硬化等一些慢性肝病中，AFP也会出现高水平表达。由于其敏感性与特异性不令人满意，美国肝病研究协会和欧洲肝病研究协会有提出不推荐将血清AFP作为常规筛查诊断指标。而AFP与其他肿瘤标志物联合应用很可能会显著增加AFP诊断的灵敏度。因此，寻找AFP以外特异性和灵敏度更高的肝癌诊断标志物，对提高肝癌的早期诊断率有重要临床价值。本研究中我们探讨检测血浆多聚免疫球蛋白受体（polymeric immunoglobulinreceptor/secretory component，PIgR/SC）与甲胎蛋白联合检测对肝癌的诊断价值。
1.资料与方法
1.1一般资料
选择2012年1月～2015年12月在连云港市第二人民医院就诊的原发性肝癌患者44例以及赣榆县人民医院同期收治的6例肝癌患者、肝硬化患者45例、肝良性占位患者30例及健康志愿者60例，肝癌患者均符合中国抗癌协会肝癌专业委员会2001年制定的《原发性肝癌》临床诊断标准，其中男33例，女17例，年龄（56.5±7.2）岁，均经手术切除病理证实为原发性肝癌；肝硬化患者均符合2005年中华医学会肝病学分会、感染病学分会联合修订的《慢性乙型肝炎防治指南》中肝硬化诊断标准，其中男31例，女14例，年龄（54.5±6.5）岁，均经临床表现、生化、CT、MRI等综合检查确诊已排除肝癌；肝良性占位患者，男11例，女1 9例，年龄（52.6±8.1），其中肝血管瘤13例，肝囊肿17例，三组间一般情况差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。同时抽取我院同期体检的健康志愿者60例作为正常对照组，其中男30例，女30例，平均年龄（50.5±9.1）岁。
1.2标本采集
所有受研究者均于清晨空腹采集外周静脉血4mL，其中2mL置入抗凝管中，3000r/min（離心半径为10cm）离心15min，分离血浆，用于检测PIgR/sC；另外2mL置人真空采血管，室温自然凝集1h后，3000r/min（离心半径为10cm）离心15min，分离血清用于检测AFP。
1.3检测方法
（1）AFP采用电化学发光全自动免疫分析系统（Cobase e601）及配套试剂盒检测患者血清中的AFP浓度。（2）PIgR/SC采用ELISA法测定，经包被、封闭、加样、加酶标体、显色、终止反应等步骤，在酶标仪双波长450nm/570 nm，检测各孔的OD值。
1.4结果判断
根据受试者工作特征（ROC）曲线确定对肝癌的诊断界值，假阳性和假阴性的病例数之和最小处为最佳临界点（cutoff值约为0.805），大于或等于cutoff值者为阳性，小于cutoff值者为阴性。联合检测时，串联要求两项结果均为阳性，并联要求其中一项阳性即判断为阳性。
1.5统计学处理
采用SPSSl6.0进行统计学分析处理，计量资料（x±s）表示，采用t检验，计数资料以百分比表示，采用X2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1各组pIgR/SC和AFP水平比较
从表1与表2可以看出，肝癌组患者PIgR/SC和AFP水平明显高于肝硬化、肝良性占位患者和志愿者3组，差异有统计学意义（P<0.05）；提示PIgR/SC诊断肝癌具有特异性，不易受到肝脏良性病变及健康人群的干扰。从表3可以看出原发性肝癌患者血浆PIgR/SC的阳性率高于AFP的阳性率（P<0.05），这可能对肝癌的诊断尤其是AFP阴性肝癌的诊断是一个有益的补充。
2.2 PIgR/SC和AFP项及联合检测对肝癌的诊断价值
PIgR/SC与AFP串联检测诊断肝癌的特异度为95.6%，明显高于单用PIgR/SC（x2=4.76，P<0.05）或AFP组（x2=10.24，P<0.05）；2项指标并联检测诊断肝癌的灵敏度为92.0%，明显高于单用PIgR/SC（x2=32.96，P<0.05减AFP组（x2=10.19，P<0.05）。提示应用PIgR/SC与AFP联合检测肝癌具有较高价值。见表4。 3.讨论
肝癌因其高病死率排行全球肿瘤第三位，对人类的生命和健康造成严重危害，其五年生存率较低。大部分患者不能早期发现，一经发现即有肝内或远处转移，仅有15%左右的患者有机会接受手术治疗。而早期肝癌患者经治疗后5年生存率可达50%～75%，因此探寻一种简便有效的检测方法来筛查或诊断肝癌对患者的治疗和预后均有着非常重要的意义。随着影像学的快速发展，肝癌的诊断技术有了长足进步，但从检查的便捷和经济等方面考虑，实验室检测项目的地位仍然不可替代。AFP是目前常用的原发性肝癌诊断标志物，但其敏感度和特异度均存在不同程度的不足，临床上有较高的假阴性率，导致肝癌的漏检率达30%～40%。本研究中，AFP的诊断敏感度为66.0%，特异性为81.5%，假阴性率达34%（17/50），与报道相符合，提示单用AFP检测不能充分支持临床诊断。寻找其他的实验室检测项目来帮助肝癌的临床诊断就非常必要。
PlgR是腺上皮细胞表达的一种糖蛋白，其能够在原发性肝癌中过表达。目前关于PIgR的研究比较多，但多数是研究肿瘤组织中PIgR过表达与肝癌术后复发或肝转移的关系，用以判断预后。而关于PIgR对原发性肝癌诊断的作用研究尚未见诸文献报道。SC是PIgR的裂解片段，有学者报道采用ELISA检测方法结合OD值半定量法成功的在人外周血中检测出PIgR/SC蛋白，我们参考其方法应用于本研究，并在受试者外周血中成功检测出了PIgR/SC蛋白，证实其检测方法可行。
检验结果显示，PIgR/SC敏感度（88.0%）明显高于AFP（66.0%），而且在AFP阴性组也有较高阳性率，提示PIgR/SC对原发性肝癌具有较高诊断价值。但据文献报道，PIgR在很多组织和器官炎症和上皮来源肿瘤中均升高，故本研究PIgR/SC的特异度偏低（68.9%）。本研究中PIgR/SC与AFP串联检测诊断肝癌的特异度为95.6%，并联检测诊断肝癌的灵敏度为92.0%，明显高于单用PIgR/SC或AFP组（P<0.05）。提示PIgR/SC+AFP联合检测可以提高肝癌的确诊率。肝癌组患者PIgR/SC水平明显高于肝硬化、肝良性占位患者和志愿者3組，差异有统计学意义（P<0.05）；提示PIgR/SC诊断肝癌具有一定的特异性。原发性肝癌患者血浆PIgR/SC的阳性率高于AFP的阳性率，提示PIgR/SC诊断肝癌的敏感性较高，这可能对肝癌的诊断尤其是AFP阴性肝癌的诊断是一个有益的补充。PIgR/SC与AFP串联检测诊断肝癌的特异度为95.6%，而2项指标并联检测诊断肝癌的灵敏度为92.0%，均明显高于单用PIgR/sC或AFP（P<0.05），提示应用PIgR/SC与AFP联合检测诊断肝癌强于PIgR/SC或AFP单项应用。
综上所述，PIgR/SC对原发性肝癌诊断具有较高价值。其敏感性高于AFP，提示PIgR/SC对肝癌的诊断或筛查具有重要的临床意义，但因PIgR/SC的特异度偏低，诊断肝癌易出现假阳性可能，而PIgR/SC+AFP联合检测可以提高肝癌的灵敏度和特异度，较好的弥补了单用PIgR/SC检测的不足，具有较大的临床应用价值。但本研究首次将血浆PIgR/SC及血清AFP联合检测用于原发性肝癌的诊断，结果尚有待进一步研究验证；对于原发性肝癌患者血浆PIgR/SC的升高机制还需进一步研究证实。本次受研究条件、病例所限，我们仅对肝癌、肝脏良性占位、肝硬化和健康体检者进行了研究，未纳入其它肿瘤或炎性占位的患者，有待于在以后的研究中进一步开展。
[关键词]多聚免疫球蛋白受体；甲胎蛋白；原发性肝癌；诊断价值
[中图分类号]R735.7
[文献标识码]A
[文章编号]2095-0616（2016）23-15-04
原发性肝癌（简称肝癌），是我国常见的恶性肿瘤之一，其发病率在世界各地都有增加的趋势，我国的新发病例占了全球肝癌病例的一半以上。肝癌具有恶性程度高、早期诊断率低、预后差、病死率高的特点，因此，肝癌的早期诊断是治疗和延长患者生存期的关键。检测肝癌血清中肿瘤标志物是目前早期诊断的主要手段之一。目前常用的肝癌肿瘤标志物为甲胎蛋白（AFP）。但临床上约有30%肝癌病人AFP无明显升高。而在慢性肝炎和肝硬化等一些慢性肝病中，AFP也会出现高水平表达。由于其敏感性与特异性不令人满意，美国肝病研究协会和欧洲肝病研究协会有提出不推荐将血清AFP作为常规筛查诊断指标。而AFP与其他肿瘤标志物联合应用很可能会显著增加AFP诊断的灵敏度。因此，寻找AFP以外特异性和灵敏度更高的肝癌诊断标志物，对提高肝癌的早期诊断率有重要临床价值。本研究中我们探讨检测血浆多聚免疫球蛋白受体（polymeric immunoglobulinreceptor/secretory component，PIgR/SC）与甲胎蛋白联合检测对肝癌的诊断价值。
1.资料与方法
1.1一般资料
选择2012年1月～2015年12月在连云港市第二人民医院就诊的原发性肝癌患者44例以及赣榆县人民医院同期收治的6例肝癌患者、肝硬化患者45例、肝良性占位患者30例及健康志愿者60例，肝癌患者均符合中国抗癌协会肝癌专业委员会2001年制定的《原发性肝癌》临床诊断标准，其中男33例，女17例，年龄（56.5±7.2）岁，均经手术切除病理证实为原发性肝癌；肝硬化患者均符合2005年中华医学会肝病学分会、感染病学分会联合修订的《慢性乙型肝炎防治指南》中肝硬化诊断标准，其中男31例，女14例，年龄（54.5±6.5）岁，均经临床表现、生化、CT、MRI等综合检查确诊已排除肝癌；肝良性占位患者，男11例，女1 9例，年龄（52.6±8.1），其中肝血管瘤13例，肝囊肿17例，三组间一般情况差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。同时抽取我院同期体检的健康志愿者60例作为正常对照组，其中男30例，女30例，平均年龄（50.5±9.1）岁。
1.2标本采集
所有受研究者均于清晨空腹采集外周静脉血4mL，其中2mL置入抗凝管中，3000r/min（離心半径为10cm）离心15min，分离血浆，用于检测PIgR/sC；另外2mL置人真空采血管，室温自然凝集1h后，3000r/min（离心半径为10cm）离心15min，分离血清用于检测AFP。
1.3检测方法
（1）AFP采用电化学发光全自动免疫分析系统（Cobase e601）及配套试剂盒检测患者血清中的AFP浓度。（2）PIgR/SC采用ELISA法测定，经包被、封闭、加样、加酶标体、显色、终止反应等步骤，在酶标仪双波长450nm/570 nm，检测各孔的OD值。
1.4结果判断
根据受试者工作特征（ROC）曲线确定对肝癌的诊断界值，假阳性和假阴性的病例数之和最小处为最佳临界点（cutoff值约为0.805），大于或等于cutoff值者为阳性，小于cutoff值者为阴性。联合检测时，串联要求两项结果均为阳性，并联要求其中一项阳性即判断为阳性。
1.5统计学处理
采用SPSSl6.0进行统计学分析处理，计量资料（x±s）表示，采用t检验，计数资料以百分比表示，采用X2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1各组pIgR/SC和AFP水平比较
从表1与表2可以看出，肝癌组患者PIgR/SC和AFP水平明显高于肝硬化、肝良性占位患者和志愿者3组，差异有统计学意义（P<0.05）；提示PIgR/SC诊断肝癌具有特异性，不易受到肝脏良性病变及健康人群的干扰。从表3可以看出原发性肝癌患者血浆PIgR/SC的阳性率高于AFP的阳性率（P<0.05），这可能对肝癌的诊断尤其是AFP阴性肝癌的诊断是一个有益的补充。
2.2 PIgR/SC和AFP项及联合检测对肝癌的诊断价值
PIgR/SC与AFP串联检测诊断肝癌的特异度为95.6%，明显高于单用PIgR/SC（x2=4.76，P<0.05）或AFP组（x2=10.24，P<0.05）；2项指标并联检测诊断肝癌的灵敏度为92.0%，明显高于单用PIgR/SC（x2=32.96，P<0.05减AFP组（x2=10.19，P<0.05）。提示应用PIgR/SC与AFP联合检测肝癌具有较高价值。见表4。 3.讨论
肝癌因其高病死率排行全球肿瘤第三位，对人类的生命和健康造成严重危害，其五年生存率较低。大部分患者不能早期发现，一经发现即有肝内或远处转移，仅有15%左右的患者有机会接受手术治疗。而早期肝癌患者经治疗后5年生存率可达50%～75%，因此探寻一种简便有效的检测方法来筛查或诊断肝癌对患者的治疗和预后均有着非常重要的意义。随着影像学的快速发展，肝癌的诊断技术有了长足进步，但从检查的便捷和经济等方面考虑，实验室检测项目的地位仍然不可替代。AFP是目前常用的原发性肝癌诊断标志物，但其敏感度和特异度均存在不同程度的不足，临床上有较高的假阴性率，导致肝癌的漏检率达30%～40%。本研究中，AFP的诊断敏感度为66.0%，特异性为81.5%，假阴性率达34%（17/50），与报道相符合，提示单用AFP检测不能充分支持临床诊断。寻找其他的实验室检测项目来帮助肝癌的临床诊断就非常必要。
PlgR是腺上皮细胞表达的一种糖蛋白，其能够在原发性肝癌中过表达。目前关于PIgR的研究比较多，但多数是研究肿瘤组织中PIgR过表达与肝癌术后复发或肝转移的关系，用以判断预后。而关于PIgR对原发性肝癌诊断的作用研究尚未见诸文献报道。SC是PIgR的裂解片段，有学者报道采用ELISA检测方法结合OD值半定量法成功的在人外周血中检测出PIgR/SC蛋白，我们参考其方法应用于本研究，并在受试者外周血中成功检测出了PIgR/SC蛋白，证实其检测方法可行。
检验结果显示，PIgR/SC敏感度（88.0%）明显高于AFP（66.0%），而且在AFP阴性组也有较高阳性率，提示PIgR/SC对原发性肝癌具有较高诊断价值。但据文献报道，PIgR在很多组织和器官炎症和上皮来源肿瘤中均升高，故本研究PIgR/SC的特异度偏低（68.9%）。本研究中PIgR/SC与AFP串联检测诊断肝癌的特异度为95.6%，并联检测诊断肝癌的灵敏度为92.0%，明显高于单用PIgR/SC或AFP组（P<0.05）。提示PIgR/SC+AFP联合检测可以提高肝癌的确诊率。肝癌组患者PIgR/SC水平明显高于肝硬化、肝良性占位患者和志愿者3組，差异有统计学意义（P<0.05）；提示PIgR/SC诊断肝癌具有一定的特异性。原发性肝癌患者血浆PIgR/SC的阳性率高于AFP的阳性率，提示PIgR/SC诊断肝癌的敏感性较高，这可能对肝癌的诊断尤其是AFP阴性肝癌的诊断是一个有益的补充。PIgR/SC与AFP串联检测诊断肝癌的特异度为95.6%，而2项指标并联检测诊断肝癌的灵敏度为92.0%，均明显高于单用PIgR/sC或AFP（P<0.05），提示应用PIgR/SC与AFP联合检测诊断肝癌强于PIgR/SC或AFP单项应用。
综上所述，PIgR/SC对原发性肝癌诊断具有较高价值。其敏感性高于AFP，提示PIgR/SC对肝癌的诊断或筛查具有重要的临床意义，但因PIgR/SC的特异度偏低，诊断肝癌易出现假阳性可能，而PIgR/SC+AFP联合检测可以提高肝癌的灵敏度和特异度，较好的弥补了单用PIgR/SC检测的不足，具有较大的临床应用价值。但本研究首次将血浆PIgR/SC及血清AFP联合检测用于原发性肝癌的诊断，结果尚有待进一步研究验证；对于原发性肝癌患者血浆PIgR/SC的升高机制还需进一步研究证实。本次受研究条件、病例所限，我们仅对肝癌、肝脏良性占位、肝硬化和健康体检者进行了研究，未纳入其它肿瘤或炎性占位的患者，有待于在以后的研究中进一步开展。