【摘 要】
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目的 探讨荜茇酰胺对体外培养的H1975非小细胞肺癌细胞增殖的影响及其机制.方法 采用不同浓度荜茇酰胺(0、1.25、2.5、5、10、20、30、40和50 μmol/L)孵育H1975细胞72 h,MTT
【机 构】
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325035浙江,温州医科大学药学院化学生物学研究中心;台州市立医院药剂科
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目的 探讨荜茇酰胺对体外培养的H1975非小细胞肺癌细胞增殖的影响及其机制.方法 采用不同浓度荜茇酰胺(0、1.25、2.5、5、10、20、30、40和50 μmol/L)孵育H1975细胞72 h,MTT法检测细胞生存率.采用荜茇酰胺0、2.5、5和10 μmol/L孵育H1975细胞,细胞集落形成实验和划痕实验分别测定细胞增殖和迁移情况,流式细胞术测定细胞凋亡情况和活性氧(ROS)水平,倒置显微镜观察ROS荧光水平、细胞焦亡情况和ROS变化对细胞焦亡的影响,Western blot法分析加斯德明E(GSDME)、GSDME-N端、GSDMD和前体Caspase-3蛋白表达的变化.结果 荜茇酰胺能够浓度依赖性地抑制细胞生长、集落形成和细胞迁移,诱导细胞凋亡和焦亡,提高细胞内ROS水平,下调GSDME、前体Caspase-3和GSDMD蛋白表达,上调GSDME-N端蛋白表达(P＜0.05).降低ROS水平后,抑制细胞焦亡(P＜0.05).结论 荜茇酰胺能促进H1975细胞凋亡,通过提高细胞内ROS水平诱导细胞焦亡;其机制可能与ROS作用于GSDMD/GSDME蛋白有关.
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