【摘 要】
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从人乳腺癌细胞系B—Cap-37中克隆出Survivin的cDNA，并对其中编码34位Thr的密码子定点突变为Ala的密码子后，经一系列基因操作方法将天然HIV—TAT转导肽的突变体基因HIV—TATm引
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所,沈阳药科大学制药工程学院,中国科学院上海生命科学院生物工程中心
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从人乳腺癌细胞系B—Cap-37中克隆出Survivin的cDNA，并对其中编码34位Thr的密码子定点突变为Ala的密码子后，经一系列基因操作方法将天然HIV—TAT转导肽的突变体基因HIV—TATm引入Survivin（T34A）基因的5’端，正确构建了表达载体pRSET-B—HIV—TATm-Survivin（T34A），经转化E.coli BL21（DE3）后诱导表达，目的蛋白质以包涵体形式表达，占菌体总蛋白的45％。经3．7L发酵罐分批发酵可收获650mg／L的包涵体，经阳离子交换、凝胶层析分离
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