探讨神经肽P物质(SP)调控骨髓基质干细胞(BMSCs)表达骨形态发生蛋白-2 (BMP-2)的时间、浓度效应及其与Wnt信号转导通路的关系。
方法取SD大鼠笫3代BMSCs,根据加入不同浓度SP将其分为4组(n = 3):对照组、10-8 mol/L SP组、10-10 mol/L SP组、10-12 mol/L SP组,于培养7、14、21 d应用Western blot法检测BMP-2、碱性磷酸酶(ALP)蛋白表达量。选择SP的最佳浓度,根据加入刺激物不同分为3组(n = 3):对照组、SP组、SP +抑制因子1 (DKK1)组,应用Western blot法检测BMP-2、β-链蛋白的表达量。
结果培养14 d,10-8 mol/L SP组、10-10 mol/L SP组ALP蛋白的表达量平均分别为1.428±0.166、1.742±0.221,10-8 mol/L SP组、10-10 mol/L SP组、10-12 mol/L SP组BMP-2蛋白的表达量平均分别为1.801±0.239、4.070±0.297、1.943±0.196;培养21 d, 10-10 mol/LSP组、10-12 mol/L SP组BMP-2蛋白的表达量平均分别为2.960±0.324、2.652±0.265,均显著髙于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。SP的最佳浓度为10-10 mol/L。培养7、14、21 d,SP组BMP-2蛋白表达量平均分别为4.300±0.297、2.290±0.175、3.160±0.234,显著高于对照组及SP + DKK1组,差异均有统计学意义(P <0.05)。培养14、21 d,SP组β-链蛋白表达量平均分别为1.553±0.210,1.471±0.170,显著高于对照组及SP + DKK1组,差异均有统计学意义(P <0.05)。
结论SP可以促进BMP-2蛋白的表达,且具有时间及浓度的特异性,SP促进BMP-2的表达可能与Wnt通路有关。