pcDNA3.1+-MBL真核表达载体构建及其在不同哺乳动物细胞株中的表达

来源 :免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lifang877
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的比较人甘露聚糖结合凝集素(MBL)基因在不同哺乳细胞株中的表达效率.方法应用PCR从含有中国人野生型MBL cDNA的质粒pGEM-MBL中扩增目的基因片段,将其克隆至pcDNA3.1+表达载体,经酶切及测序鉴定后,以电穿孔法转染CHO、HEPG2和HEK293细胞,以RT-PCR、ELISA分析其在3株细胞中的表达情况.结果从pGEM-MBL中扩增得到约750 bp的MBL DNA片段,构建成重组表达载体pcDNA3.1+-MBL,经酶切出现750 bp片段,测序鉴定与预期的完全一致.将其转染进细胞
其他文献
目的构建粉尘螨Ⅰ类抗原(Der f 1)eDNA基因的重组表达质粒,并于E-coli表达。方法用BamHⅠ和Sac Ⅰ从重组质粒pMD-18T-Der f1上切下Der f1基因,插入表达载体pET32a(+)质粒,转化大
目的 制备特异性的西维因单克隆抗体。方法 合成了西维因的半抗原并对其进行了结构鉴定,将半抗原与牛血清白蛋白和卵清蛋白共价偶联分别制备免疫抗原和包被抗原。再将免疫的Ba
目的获得大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)与幽门螺杆菌保护性抗原热休克蛋白A亚单位(HspA)的融合蛋白.方法 PCR扩增ltB和hspA基因,依次构建至表达载体pIM-1,转化大肠杆菌,S
目的 在克隆IκBα基因并构建IκBαM的基础上,构建重组腺病毒AdIκBαM。方法 将IκBαM克隆至穿梭质粒,线性化后与骨架质粒共同转染BJ5183菌,构建重组腺病毒质粒。酶切及PCR法
海马作为边缘系统的结构之一, 既往的研究显示海马与记忆、情绪和行为变化等有关.近十年来, 海马对免疫功能的影响尤引人关注.海马调控免疫应答的大量实验工作表明:海马作为
目的建立分泌抗EPF(Early pregnancy factor,早孕因子)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化单抗并鉴定。方法用本实验室已纯化的早孕和肿瘤源性:EPF作为抗原刺激Balb/c小鼠,用免疫后的
目的观察促进与抑制c-Jun蛋白表达对糖皮质激素受体(GR)表达和转录激活能力的影响,探索c-Jun与GR功能的相互关系。方法采用基因重组技术,构建PAVU6-c Jun siRNA干涉质粒,电穿孔
目的观察TLSFJM对大鼠小肠移植受体外周血及移植肠浸润T细胞的影响和对排斥反应的抑制效应.方法应用免疫组化SABC法检测受体外周血及移植肠CD4+、CD8+、CD25+淋巴细胞和IL-4
子宫颈癌为妇女最常见的恶性肿瘤之一,其与人乳头瘤病毒(HPV)密切相关.HPV早期基因E6、E7的持续表达是维持癌细胞转化状态所必须的.因此,E6、E7可作为宫颈癌治疗的靶点.目前,
铝佐剂是到目前为止唯一被批准用于人用疫苗的佐剂,长期普遍用于多种疫苗.最近,在幽门螺杆菌(Helico-bacterpylori,Hp)疫苗的研究中,有一些关于铝佐剂的报道.本文就铝佐剂的