【摘 要】
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本试验旨在研制一种自主组装的间接竞争酶联免疫吸附测定(icELISA)试剂盒,用于饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的检测。在制备抗DON单克隆抗体的基础上,建立icELISA标准曲线,
【机 构】
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石河子大学动物科技学院; 河南科技学院动物科技学院;
【基金项目】
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“十二五”国家科技支撑计划项目“激素类药物快速检测技术研究与示范”(2014BAD13B05-01);新疆生产建设兵团重点领域科技攻关项目(2018AB041);第八师现代农业科技攻关与成果转化项目(2018NY05)
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本试验旨在研制一种自主组装的间接竞争酶联免疫吸附测定(icELISA)试剂盒,用于饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的检测。在制备抗DON单克隆抗体的基础上,建立icELISA标准曲线,并对其检测方法进行优化,然后用于测定试剂盒各项性能,将测定结果与高效液相色谱(HPLC)法测定结果进行比较分析。结果显示:本试验研制的icELISA试剂盒对DON的最低检测浓度为1. 147 ng/mL,检测范围为1. 50～130. 31 ng/mL,半抑制浓度(IC50)为9.84 ng/mL。对小麦、玉米、猪料、鸡料4个样品进行添加回收试验,回收率在77.1%～113.2%,相对标准偏差(RSD)在4.2%～12.6%。并且,该试剂盒具有特异性高、稳定性良好、有效使用寿命长且样品基质干扰可以忽略不计等优点。利用该试剂盒测定20个盲样,其测定结果与HPLC法测定结果一致性良好。上述结果说明本试验研制的DON icELISA试剂盒各项性能符合相关技术要求,对DON检测具有准确可靠、方便快捷、高通量大等特点,可满足市场对DON的快速初筛需求。
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