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背景:Notch信号活化对干细胞分化有重要的影响,其效应具有细胞特异性,但有关Notch信号与c-Kit+骨髓间充质干细胞分化的相关报道较少。目的:分析Notch1信号活化对c-Kit+骨髓间充质干细胞分化的影响。方法:应用PCR从c DNA文库中调取Notch1受体胞内域（N1-ICD）序列,定向克隆入腺病毒穿梭质粒GV314构建重组质粒,与腺病毒辅助包装质粒p BHGlox?E1,3 Cre在HEK293T细胞进行同源重组,获得N1-ICD过表达腺病毒颗粒（N1-ICD-Ad）。分离SD大鼠股骨骨髓间充质干细胞,应用磁激活细胞分选法分选出c-Kit+亚群并用流式鉴定其纯度。将N1-ICD-Ad腺病毒感染c-Kit+骨髓间充质干细胞,8 d后定量RT-PCR或免疫荧光分析c-Kit+骨髓间充质干细胞中Notch1信号的活化及细胞的分化。结果与结论:（1）从c DNA文库中成功获得N1-ICD序列,将此序列成功克隆入线性化GV314载体,抗性克隆经测序证实无误;（2）在辅助包装质粒p BHGloxΔE1,3 Cre的协助下,成功获得滴度为2×1012PFU/L重组腺病毒颗粒N1-ICD-Ad;（3）成功从SD大鼠骨髓间充质干细胞获得c-Kit+细胞亚群,纯度达91.6%。包装的腺病毒能有效感染c-Kit+骨髓间充质干细胞;（4）与空白对照组和阴性对照病毒组相比,N1-ICD-Ad感染c-Kit+骨髓间充质干细胞后N1-ICD在胞质与胞核聚集,显著上调了Notch下游基因Hes1的表达,显著诱导心肌细胞分化基因Nkx2.5和c Tn T的表达,显著上调内皮细胞分化基因v WF的表达,轻微上调平滑肌细胞分化基因SM22α的表达。（5）实验结果提示Notch1信号的活化有助于c-Kit+骨髓间充质干细胞的多向分化,N1-ICD过表达载体构建及腺病毒的包装并转染成功,为进一步研究Notch1信号活化对于干细胞生物学功能的影响奠定了基础。