大鼠肾皮质受体相关蛋白克隆基因重组表达质粒的构建及分子生物学鉴定

来源 :南通医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong431
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运用DNA重组技术,将用RT-PCR方法克隆的大鼠肾皮质受体相关蛋白319个氨基酸的核苷酸序列导入载体pBluescript和表达载体pGEX中,分别构建了重组质粒pBSK9RAP和pGEX-9RH7,转化入大肠杆菌XL1-Blue和DH5α中,经IPTG、x-gal和抗生素筛选阳性克隆,扩增后,重组质粒用限制性内切酶图谱分析及DNA测序分析,证明插入子插入方向正确,表达阅读框架正确。 The nucleotide sequence of 319 amino acids of rat renal cortex receptor-related protein cloned by RT-PCR was introduced into vector pBluescript and expression vector pGEX by using DNA recombination technology. Recombinant plasmids pBSK9RAP and pGEX-9RH7 were constructed and transformed respectively The recombinant plasmids were screened by IPTG, x-gal and antibiotics. After amplification, the recombinant plasmids were confirmed by restriction enzyme analysis and DNA sequencing. The framework is correct.
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