T-bet基因转染对哮喘小鼠脾脏Th1/Th2平衡的影响

来源 :中山大学学报(医学科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:atom1999
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【目的】观察气道内T-bet基因转染对哮喘小鼠脾脏淋巴细胞Th1/Th2平衡、T-bet及GATA-3mRNA表达的影响。【方法】将C57BL/6小鼠32只随机分为4组,每组8只,分别为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、空质粒干预组(C组)和T-bet质粒干预组(D组)。卵白蛋白(OVA)抗原溶液腹腔注射致敏,滴鼻造模。空质粒组和T-bet质粒干预组OVA激发24h前,分别经鼻滴入50μg空质粒、重组T-bet质粒,对照组用生理盐水代替OVA。最后一次滴鼻激发48h后处死小鼠,流式细胞仪检测各组实验小鼠的脾脏淋巴细胞的Th1/Th2,RT-PCR检测小鼠脾脏淋巴细胞的T-bet及GATA-3mRNA表达。【结果】哮喘小鼠气道转染pcDNA3-T-bet质粒后:①流式细胞仪检测发现,脾脏Th1百分率较哮喘模型组显著升高[(2.29±1.55)%vs.(1.93±1.14)%,P﹤0.05],Th2百分率显著降低[(0.93±0.64)%vs.(1.63±0.59)%];②RT-PCR检测发现脾脏淋巴细胞转录因子T-bet mRNA表达水平显著增加(0.53±0.027vs.0.28±0.035,P﹤0.05),GATA-3mRNA表达水平显著降低(0.24±0.022vs.0.58±0.038,P﹤0.05)。而pcDNA3空质粒干预后与哮喘模型组比较无显著差异。【结论】气道内转导pcDNA3-T-bet质粒后,可显著上调哮喘小鼠体内T-betmRNA表达,下调GATA-3mRNA表达,有效改善哮喘小鼠体内Th1/Th2比例失衡,从而抑制哮喘小鼠的气道炎症,为哮喘的T-bet基因治疗提供依据。
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