应用显微荧光测钙技术研究乙酰胆碱对豚鼠耳蜗外毛细胞内游离钙的影响

来源 :临床耳鼻咽喉科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bencui
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介绍了应用显微荧光测钙技术研究豚鼠耳蜗外毛细胞(OHC)内游离钙浓度([Ca~(2+)]i)变化的方法。该技术以钙敏感染料Fura-2作为胞内Ca~(2+)的指示剂,装载进入细胞后,与胞内游离Ca~(2+)结合,在特定波长光的激发下可发出荧光,由此可推算[Ca~(2+)]i的变化。结果发现乙酰胆碱(ACh)在含钙的细胞外液中可引起[Ca~(2+)]i升高。对显微荧光测钙技术在研究耳蜗毛细胞中的应用以及ACh引起[Ca~(2+)]i升高的机制进行了讨论。 A method for the determination of intracellular free calcium concentration ([Ca ~ (2 +)] i) in guinea pig cochlear outer hair cells (OHC) by using fluorescence microscopy was introduced. The technology uses calcium-sensitive dye Fura-2 as an indicator of intracellular Ca 2+, and after being loaded into the cell, binds to intracellular free Ca 2+ and emits fluorescence when excited by specific wavelength light. From this we can calculate the change of [Ca ~ (2 +)] i. The results showed that acetylcholine (ACh) in calcium-containing extracellular fluid can cause [Ca ~ (2 +)] i increased. The application of microfluorescence calcium measurement in studying cochlear hair cells and the mechanism of [Ca ~ (2 +)] i increase induced by ACh were discussed.
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