【摘 要】
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目的 研究酪氨酸激酶Src和酪氨酸磷酸酶SHP-2在脓毒症相关性脑病中的变化及其意义. 方法 Wistar大鼠88只按照随机数字表法分为脓毒症组(n=80)和对照组(n=8).脓毒症组大鼠通过
【机 构】
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南方医科大学珠江医院儿科, 广州,510282
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目的 研究酪氨酸激酶Src和酪氨酸磷酸酶SHP-2在脓毒症相关性脑病中的变化及其意义. 方法 Wistar大鼠88只按照随机数字表法分为脓毒症组(n=80)和对照组(n=8).脓毒症组大鼠通过腹腔注射革兰阴性菌脂多糖(LPS) 10 mg/kg建立脓毒症相关性脑病模型(32只大鼠成功建模),并分别在建模后6h、12h、24 h和48 h处死大鼠并取脑组织.对照组大鼠给予腹腔注射10mg/kg 0.9％生理盐水后即刻处死,取脑组织作为对照组标本.通过Westem blotting、实时定量PCR(RT-PCR)和免疫荧光染色法观察Src和SHP-2蛋白及mRNA的变化.比较给予活性Src和SHP-2蛋白与线粒体蛋白反应前后呼吸链复合物酶活性的变化情况. 结果 Western blotting 、RT-PCR结果显示脓毒症组大鼠Src在6h出现明显的下降,持续至48 h;同时间段SHP-2则出现明显的上升,与对照组比较差异均具有统计学意义(P＜0.05).免疫荧光染色结果也显示48 h脓毒症组大鼠Src表达较对照组明显下降,而SHP-2表达则明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与活性Src蛋白反应后,48 h脓毒症组大鼠呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ酶活性明显升高,与活性SHP-2蛋白反应后呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ酶活性明显下降,差异均具有统计学意义(P＜0.05). 结论 脓毒症相关性脑病模型中,酪氨酸激酶Src和酪氨酸磷酸酶SHP-2可能是通过下调线粒体蛋白磷酸化降低了线粒体呼吸链复合物酶活性,从而导致线粒体功能障碍.
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