【摘 要】
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利用RT-PCR和RACE技术,从珍稀观赏植物金花茶(Camellia nitidissima)花瓣中克隆得到了一个8番茄红素ε–环化酶(lycopeneε-cyclase,LCYE)基因c DNA全长,命名为Cn LCYE。碱基
【机 构】
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1玉林师范学院, 玉林, 537000; 2青岛农业大学, 青岛, 266109;
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利用RT-PCR和RACE技术,从珍稀观赏植物金花茶(Camellia nitidissima)花瓣中克隆得到了一个8番茄红素ε–环化酶(lycopeneε-cyclase,LCYE)基因c DNA全长,命名为Cn LCYE。碱基序列分析显示,Cn LCYE基因全长2 149 BP,包含291 bp的5’非翻译区(untranslated regions,UTR)、265 bp的3’UTR和1 593 9bp编码530个氨基酸的开放阅读框。该基因编码的蛋白质含有2个跨膜结构域,一个NADB_Rossmann 1011 superfamily结构域以及番茄红素ε–环化酶结构域(PLN02697)。Cn LCYE蛋白二级结构以无规则卷曲为主,12其次为α-螺旋,β-折叠所占比例最少。氨基酸序列比对分析结果显示,Cn LCYE与茄科、蔷薇科等植物13 LCYE蛋白同源性都在70%以上,与普洱茶(Camellia sinensis var.assamica)LCYE同源性最高。根据该14 Cn LCYE全长序列设计带有KpnⅠ和Bam HⅠ位点的全长扩增引物扩增基因全长,用KpnⅠ和Bam HⅠ双酶15切后与表达载体p CAMBIA1300连接,成功构建了Cn LCYE基因的正义表达载体,为深入研究Cn LCYE基因的功能及其对花色的调控作用提供了帮助。16
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