金黄色葡萄球菌ClfA基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ncwu521
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根据GenBank中ClfA基因序列设计特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,进行PCR扩增,获得了约2300bp的DNA片段。将PCR产物克隆至pMD18-T载体中,构建了克隆质粒pMD18-ClfA。用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切pMD18-ClfA和pET28a(+).将纯化的基因ClfA亚克隆至pET28a(+),构建重组质粒pET28a—ClfA,并将其转化至大肠杆菌感受态BL21(DE3)中,经1mmol/L IPTG诱导和SDS—PAGE分析,在87000处出现了与目的蛋白一致的外
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