【摘 要】
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目的 筛选有效干扰同源盒( HOX) A10基因表达的特异性干扰性小RNA( siRNA)序列并鉴定其功能,为利用RNA干扰技术靶向HOXA10防治肿瘤提供实验依据.方法 设计合成3对针对HOXA10基因不同位点的siRNA序列,应用阳离子脂质体介导转染人肺腺癌A549细胞,采用反转录-聚合酶链反应( RT-PCR)检测HOXA10 mRNA表达,以HOXA10与β-actin灰度比值(ODR)表
【机 构】
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256603山东滨州,滨州医学院附属医院儿科,256603山东滨州,滨州医学院附属医院儿科,256603山东滨州,滨州医学院附属医院儿科,滨州医学院生化与分子生物学教研室
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目的 筛选有效干扰同源盒( HOX) A10基因表达的特异性干扰性小RNA( siRNA)序列并鉴定其功能,为利用RNA干扰技术靶向HOXA10防治肿瘤提供实验依据.方法 设计合成3对针对HOXA10基因不同位点的siRNA序列,应用阳离子脂质体介导转染人肺腺癌A549细胞,采用反转录-聚合酶链反应( RT-PCR)检测HOXA10 mRNA表达,以HOXA10与β-actin灰度比值(ODR)表示相对表达水平.筛选出抑制HOXA10效果最佳的siRNA序列,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)和流式细胞术分别检测该siRNA干扰HOXA10后对A549细胞增殖和凋亡的影响.结果 3对siRNA均能抑制HOXA10的表达,其中siRNA1抑制HOXA10 mRNA的表达最为明显,ODR为(20.190±1.698) ％;siRNA1对A549细胞的增殖抑制率可达(69.793±2.092)％;siRNA转染后细胞凋亡率显著提高,siRNA1诱导A549凋亡作用最为明显,凋亡率为( 29.593±2.670)％.结论 筛选出的siRNA1序列可有效沉默HOXA10基因的表达,并能有效抑制A549细胞增殖、促进其凋亡。
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