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目的
检测肿瘤坏死因子超家族成员9(TNFSF9)在人肝癌组织的表达,探讨TNFSF9过表达对肝癌细胞增殖和侵袭的作用及其分子机制。
方法免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测TNFSF9在50例人肝癌及癌旁组织的表达。利用慢病毒载体构建稳定过表达TNFSF9的肝癌HepG2细胞株,Real-time PCR和Western blot检测TNFSF9、增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平。噻唑蓝(MTT)法和Transwell实验检测TNFSF9过表达对肝癌细胞增殖和侵袭的影响。
结果与癌旁组织(0.30±0.03)比较,TNFSF9在肝癌组织的mRNA表达量较低(0.18±0.02),其蛋白在肝癌组织的阳性表达率较低(26.0%比54.0%,P=0.004)。体外实验结果显示,TNFSF9过表达减少PCNA和MMP-9蛋白的表达,并抑制肝癌细胞增殖活性;与对照组穿过小室的细胞数[(105.5±11.2)个]比较,TNFSF9组侵袭的肝癌细胞数([52.8±7.4)个]明显减少(P=0.000)。
结论TNFSF9在人肝癌组织低表达,其过表达抑制肝癌细胞的增殖和侵袭潜能。