探讨微小RNA-24(miR-24)对人骨肉瘤细胞株U2OS体外增殖与迁移能力的影响及其可能的机制。
方法通过转染miR-24模拟物(miR-24 mimic)建立miR-24过表达的U2OS细胞株，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)、细胞活力检测方法(CCK-8法)和Transwell检测对照组、阴性对照组和miR-24过表达组3组细胞增殖及迁移能力的变化；Western blotting检测细胞的上皮间质转化(EMT)进程及核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的活性。
结果对照组、阴性对照组和miR-24过表达组miR-24的表达水平分别为1.00±0.00、1.03±0.08和2.46±0.29，3组间差异有统计学意义(F＝11.026，P＝0.012)，转染了miR-24 mimic后，人骨肉瘤细胞株U2OS中的miR-24表达水平与对照组相比显著升高(t＝4.604，P＝0.009)。与对照组相比，人骨肉瘤细胞株U2OS过表达miR-24 24 h[(3.56±0.27)%∶(8.63±0.79)%]、48 h[(20.16±1.09)%∶(54.77±5.42)%)]和72 h[(45.47±3.16)%∶(95.52±8.56)%]后细胞增长率均明显降低，差异均有统计学意义(t＝3.896，P＝0.016；t＝4.813，P＝0.008；t＝7.173，P＝0.002)。过表达miR-24 24 h后，对照组、阴性对照组和miR-24过表达组细胞相对迁移率分别为(100.00±0.00)%、(99.26±5.85)%和(31.37±2.09)%，3组间差异有统计学意义(F＝12.175，P＝0.009)；与对照组相比，过表达miR-24后细胞迁移率明显降低(t＝3.843, P＝0.014)。同时过表达miR-24上调细胞中上皮细胞标志物上皮细胞钙黏蛋白(E-cadhe-rin，t＝3.852，P＝0.018)和β-连环素蛋白(β-catenin)的表达(t＝3.512，P＝0.024)，而下调间质细胞标志物神经钙黏蛋白(N-cadherin，t＝3.832，P＝0.018)和波形蛋白(vimentin)的表达(t＝4.058，P＝0.012)，抑制U2OS的EMT进程。此外，过表达miR-24可下调NF-κB(p65)(t＝4.813，P＝0.008)、磷酸化核因子IκB激酶抑制剂α(p-IKK-α)(t＝3.764，P＝0.013)和磷酸化激活IκB激酶复合物α(p-IκB-α)的表达(t＝4.064，P＝0.012)，抑制NF-κB信号通路的激活。
结论miR-24可抑制人骨肉瘤细胞株U2OS体外增殖与迁移，其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路的激活，进而抑制细胞的EMT进程相关。提示miR-24可作为治疗骨肉瘤迁移的一个潜在作用位点。