【摘 要】
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目的:探寻一种快速的、便捷的改造已知载体多克隆位点的方法。方法:应用一对5’末端分别添加了多个酶切位点的引物扩增任一已知DNA片段,用两端的限制性酶酶切后连接至载体多
【机 构】
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扬州大学农学院 江苏省作物遗传生理国家重点实验室培育点/教育部植物功能基因组学重点实验室; 江苏里下河地区农业科学研究所; 扬州职业大学生化工程系;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31201180);江苏省自然科学基金项目(BK2008223;BK2012690);江苏高校优势学科建设工程项目资助
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目的:探寻一种快速的、便捷的改造已知载体多克隆位点的方法。方法:应用一对5’末端分别添加了多个酶切位点的引物扩增任一已知DNA片段,用两端的限制性酶酶切后连接至载体多克隆位点中,从而引入两个新的酶切位点。我们将这一方法称为衔接子引物-PCR引入法。结果:两个研究实例的酶切结果证实:结果预先设计的酶切位点已替换至载体的多克隆位点,且引入的酶切位点能被顺利切割。结论:衔接子引物-PCR引入法是一种改造已知载体多克隆位点的可行方法。
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