目的:探讨低温暴露对真皮微血管内皮细胞损伤效应及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:利用非连续密度梯度Percoll分离液原代分离培养大鼠真皮微血管内皮细胞(DMVECs),免疫荧光检测CD31抗原的表达并结合形态学鉴定细胞。将DMVECs暴露于不同低温(28℃、12℃及0℃)条件下24 h,建立低温细胞暴露模型,通过倒置显微镜观察细胞形态,测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性评价细胞膜完整性,应用半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:培养的DMVECs呈典型的鹅卵石样排列,CD31抗原表达呈阳性。大鼠DMVECs于不同低温暴露24 h后,与37℃组比较,28℃组及12℃细胞形态趋于"成纤维样",而0℃组细胞出现明显的皱缩;28℃,12℃及0℃组细胞培养液中LDH活性(U/L)分别为54.17±3.02,64.66±3.03,82.13±10.91,与37℃组(12.23±3.03)比较统计学差异显著(P<0.01);28℃组及12℃组VEGFmRNA表达上调(P<0.05),但0℃组与37℃无统计学差异。结论:随温度降低,大鼠DMVECs损伤程度加重,其中VEGF可能参与低温致皮下血管通透性的增加。