【摘 要】
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目的 探讨苯并芘(Benz[a]anthracene,BaP)通过氧化应激对人角质形成细胞炎性因子和凋亡的影响.方法 利用传统方法培养人角质形成细胞HaCaT,以0.2、1.0、5.0、25.0和100.0μM
【机 构】
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重庆市人民医院(三院院区)急诊科 400014
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目的 探讨苯并芘(Benz[a]anthracene,BaP)通过氧化应激对人角质形成细胞炎性因子和凋亡的影响.方法 利用传统方法培养人角质形成细胞HaCaT,以0.2、1.0、5.0、25.0和100.0μM浓度的BaP溶液对HaCaT细胞进行染毒,分别培养24 h、48 h和72 h后,测定细胞存活率,确定BaP最佳染毒浓度和染毒时间.设立对照组、BaP组、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC,5 mM)组、NAC+BaP组,染毒培养24h后测定HaCaT细胞内ROS水平、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、以及细胞培养上清中白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)活力,同时检测细胞的凋亡率.结果 在一定范围内,HaCaT细胞存活率随BaP浓度的增加而降低,具有剂量和时间效应关系.根据结果分析选择5.0μM作为BaP的刺激浓度,作用时间为24h.与对照组比较,BaP组细胞内GSH/GSSG值和SOD活力较低,细胞培养上清中IL-6和TNF-α 浓度较高,细胞凋亡率增加,差异均具有统计学意义(P<0.05);与BaP组相比,NAC+BaP组细胞内GSH/GSSG值和SOD活力升高,细胞培养上清中IL-6和TNF-α 浓度降低,细胞凋亡率减少,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 BaP能对人角质形成细胞HaCaT造成氧化损伤,改变细胞内氧化还原状态,并可能诱导人角质形成细胞合成炎症因子参与炎症反应,最终诱导细胞凋亡;而抗氧化剂NAC可以抑制BaP暴露对人角质形成细胞HaCaT的氧化损伤、炎症介质释放和凋亡的发生.
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