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目的探讨密度感应(QS)信号分子OdDHL在铜绿假单胞菌(PA)抑制外周血γδT细胞合成胰岛素样生长因子1(IGF-1)过程中所起的作用及其机制。方法 (1)分离纯化健康成人外周血γδT细胞,细胞同步后配成浓度为5×106个/m L的细胞悬液放入6孔培养板,每孔2 m L,按随机数字表法将培养板孔分为6组,每组设3个复孔,分别加入0、12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μmol/L浓度OdDHL各20μL,在37℃,5%CO2培养箱中培养24 h。用WST-l细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测γδT细胞的活性,用Annexin V/PI双染检测试剂盒检测γδT细胞的凋亡。(2)分离纯化健康成人外周血γδT细胞,细胞同步后配成浓度为5×106个/m L的细胞悬液放入6孔培养板,每孔2 m L,按随机数字表法将培养板孔分为4组,阳性对照组和阴性对照组每组设3个复孔,剩余2组分为2个OdDHL浓度水平处理组,每组设5个复孔,阳性对照组加入终浓度为10 mg/L的Con A,阴性对照组加入相应体积的PBS。2个OdDHL处理组在加入终浓度为10 mg/L的Con A后分别加入25、50μmol/L的OdDHL 20μL。在37℃,5%CO2培养箱中培养48 h。用ELISA法测定培养上清中IGF-1浓度,用实时荧光定量PCR测定γδT细胞TLR4 mRNA,用Western blot法测定γδT细胞TLR4蛋白,用流式细胞仪检测γδT细胞CD80、CD86的表达。对数据行F检验和q检验。结果 (1)OdDHL浓度达到100μmol/L可明显抑制γδT细胞活性,提高细胞的凋亡,而低于50μmol/L的OdDHL却对γδT细胞活性无明显影响。(2)培养上清中IGF-1在阴性对照组为(14.32±2.34)μg/m L,在阳性对照组为(139.58±11.73)μg/m L,在25μmol/L的OdDHL处理组为(85.64±7.52)μg/m L,在50μmol/L的OdDHL处理组为(56.49±4.93)μg/m L,统计学分析显示差异有统计学意义(F=296.69,P<0.05)。(3)γδT细胞TLR4 mRNA表达值在阴性对照组是0.91±0.13;在阳性对照组是5.07±0.72,在25μmol/L的OdDHL处理组是3.36±0.45,在50μmol/L的OdDHL处理组是1.56±0.21,统计学分析显示差异有统计学意义(F=107.98,P<0.05)。γδT细胞TLR4蛋白表达值在阴性对照组是0.52±0.09;在阳性对照组是2.27±0.51,在25μmol/L的OdDHL处理组是1.14±0.17,在50μmol/L的OdDHL处理组是0.78±0.15,统计学分析显示差异有统计学意义(F=41.86,P<0.05)。γδT细胞表面CD80表达率在阴性对照组是(3.92±0.49)%;在阳性对照组是(52.65±4.26)%,在25μmol/L的OdDHL处理组是(23.04±2.53)%,在50μmol/L的OdDHL处理组是(12.88±1.65)%,统计学分析显示差异有统计学意义(F=586.901,P<0.05)。γδT细胞表面CD86表达率在阴性对照组是(1.61±0.15)%;在阳性对照组是(22.03±3.17)%,在25μmol/L的OdDHL处理组是(9.59±1.06)%,在50μmol/L的OdDHL处理组是(5.76±0.95)%,统计学分析显示差异有统计学意义(F=231.126,P<0.05)。结论PA分泌的QS信号分子OdDHL可通过促进细胞凋亡或抑制细胞激活来减少γδT细胞IGF-1的合成,影响全身烧伤创面的愈合。