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【摘要】 目的 研究乙型肝炎病毒外膜大蛋白在血清中的表达及其临床意义。方法 收集78例乙型肝炎病毒感染者的血清标本，检测血清乙型肝炎病毒外膜大蛋白，同时检测这些标本中的乙肝病毒脱氧核糖核酸载量、乙肝表面抗原含量及血清谷丙转氨酶水平。结果 大蛋白阳性组的病毒脱氧核糖核酸载量、表面抗原含量和谷丙转氨酶水平均明显高于阴性组。结论 血清乙型肝炎病毒大蛋白的表达在乙型肝炎病毒活动及发病机制中可能有重要作用。
【关键词】 乙型肝炎病毒大蛋白；乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸；乙肝表面抗原
文章编号：1004-7484（2013）-12-7104-02
我国是乙型肝炎的高发地区，目前大约有1.2亿乙型肝炎病毒感染者，乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）是该病的主要病原体[1]。乙型肝炎的进展和病毒的复制活动密切相关。长期以来，临床上主要通过酶联免疫法和聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）监测病毒复制情况。近年来，随着对乙型肝炎病毒机构研究的深入，人们发现乙型肝炎病毒外膜大蛋白（hepatitis B virus large protein，HBV LP）是乙型肝炎病毒颗粒成熟包装的重要成分，可以反映病毒在体内的复制[2]。本文采用酶联免疫法检测乙型肝炎病毒大蛋白，探讨其与病毒复制及肝功能损害的关系。
1 资料与方法
1.1 病例资料 2012年7月至2012年12月来我院就诊的门诊或住院的表面抗原阳性患者78例，其中男性60例，女性18例，年龄20-73岁，平均42.8岁。
1.2 方法 患者均为清晨空腹采血5ml，经离心后分离血清备用。血清ALT检测采用日本日立公司的7600型全自动生化分析仪，试剂购自日本和光纯药工业株式会社。乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）检测使用美国PerkinElmer公司的Auto DELFIA1235型全自动时间分辨荧光免疫分析仪，试剂购自中山大学达安基因股份有限公司。乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（HBV DNA）检测采用美国ABI公司的7500型实时荧光定量PCR仪，试剂购自上海复星长征医学科学有限公司。HBV LP检测采用酶联免疫吸附法，试剂由北京热景生物技术有限公司提供。
1.3 数据处理 采用SPSS13.0进行数据的统计学分析处理，计数资料率的比较采用卡方检验，计量资料两组均数比较采用t检验。
2 结 果
2.1 患者的分组及年龄性别情况 将78例患者根据乙型肝炎病毒外膜大蛋白的检测结果分为大蛋白阳性组和大蛋白阴性组共两组，两组性别分布经统计学检验未见有统计学差异，但大蛋白阳性组平均年龄比大蛋白阴性组小，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。
3 讨 论
乙型肝炎病毒的血清学标志物一直是检测病毒感染的重要指标，乙型肝炎病毒外膜大蛋白具有双层跨膜结构，参与病毒的装配和感染，可激活病毒复制[3]，從而在乙型肝炎的发病和疾病进展中发挥作用。由于乙型肝炎病毒复制过程中释放病毒颗粒进入血液循环系统，因此血清中可以检测到HBV DNA和HBsAg，而且HBV DNA是最直接反映体内病毒复制情况的指标，大蛋白阳性组的HBV DNA平均水平比阴性组高出几十倍，HBsAg平均值也是阴性组的两倍以上，说明大蛋白阳性组的病毒复制活动较强，相应的也导致患者的肝功能损害情况也较严重，大蛋白阳性组的血清ALT水平也明显高于阴性组（P<0.05）。本文中大蛋白阴性组的ALT平均水平接近于正常参考值上限40U/L，说明大蛋白阴性组虽然HBV DNA和HBsAg水平均显示患者被病毒感染，有相当一部分患者肝功能是正常或接近正常的。在本文显示的结果中病毒的复制活跃程度与年龄也有一定关系，大蛋白阳性组的平均年龄要小于大蛋白阴性组，可能是年轻人的免疫功能较强，易于诱发对病毒的免疫清除反应，但本文只是初步探讨，这还有待于进一步的研究。
乙型肝炎病毒的复制活动观察采用HBV DNA检测是最直接的方法，但是病毒核酸的定量检测需要建立符合卫生部要求的临床基因扩增检测实验室，还要购置昂贵的仪器设备，对实验室的环境人员等各方面条件要求较高，在一般的基层医院很难开展。采用酶联免疫法检测乙型肝炎病毒外膜大蛋白，可以反映乙型肝炎病毒复制活跃程度，作为病毒感染后诊断、治疗及预后判断的重要监测指标，而且酶联免疫法检测方法成熟，操作简单，对设备要求不高，在广大基层医院便于开展[4-5]。
参考文献
[1] 骆抗先.乙型肝炎基础和临床.第2版.北京：人民卫生出版社，2001.
[2] Bruss V.Envelopment of the hepatitis B virus nucleocapsid[J].Virus Res，2004，106：199-209.
[3] Lambert C，Mann S，Prange R.Assessment of determinants affecting the dual topology of hepadnaviral large envelope proteins[J].J Gen Virol，2004，85：1221-1225.
[4] 毛小红.乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测的临床意义[J].放射免疫学杂志，2009，22（5）：511-513.
[5] 莫喜明，许允，董存岩，等.乙肝病毒外膜大蛋白检测在病毒复制判定中的意义[J].中国实验诊断学，2009，13（11）：1591-1593.
【关键词】 乙型肝炎病毒大蛋白；乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸；乙肝表面抗原
文章编号：1004-7484（2013）-12-7104-02
我国是乙型肝炎的高发地区，目前大约有1.2亿乙型肝炎病毒感染者，乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）是该病的主要病原体[1]。乙型肝炎的进展和病毒的复制活动密切相关。长期以来，临床上主要通过酶联免疫法和聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）监测病毒复制情况。近年来，随着对乙型肝炎病毒机构研究的深入，人们发现乙型肝炎病毒外膜大蛋白（hepatitis B virus large protein，HBV LP）是乙型肝炎病毒颗粒成熟包装的重要成分，可以反映病毒在体内的复制[2]。本文采用酶联免疫法检测乙型肝炎病毒大蛋白，探讨其与病毒复制及肝功能损害的关系。
1 资料与方法
1.1 病例资料 2012年7月至2012年12月来我院就诊的门诊或住院的表面抗原阳性患者78例，其中男性60例，女性18例，年龄20-73岁，平均42.8岁。
1.2 方法 患者均为清晨空腹采血5ml，经离心后分离血清备用。血清ALT检测采用日本日立公司的7600型全自动生化分析仪，试剂购自日本和光纯药工业株式会社。乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）检测使用美国PerkinElmer公司的Auto DELFIA1235型全自动时间分辨荧光免疫分析仪，试剂购自中山大学达安基因股份有限公司。乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（HBV DNA）检测采用美国ABI公司的7500型实时荧光定量PCR仪，试剂购自上海复星长征医学科学有限公司。HBV LP检测采用酶联免疫吸附法，试剂由北京热景生物技术有限公司提供。
1.3 数据处理 采用SPSS13.0进行数据的统计学分析处理，计数资料率的比较采用卡方检验，计量资料两组均数比较采用t检验。
2 结 果
2.1 患者的分组及年龄性别情况 将78例患者根据乙型肝炎病毒外膜大蛋白的检测结果分为大蛋白阳性组和大蛋白阴性组共两组，两组性别分布经统计学检验未见有统计学差异，但大蛋白阳性组平均年龄比大蛋白阴性组小，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。
3 讨 论
乙型肝炎病毒的血清学标志物一直是检测病毒感染的重要指标，乙型肝炎病毒外膜大蛋白具有双层跨膜结构，参与病毒的装配和感染，可激活病毒复制[3]，從而在乙型肝炎的发病和疾病进展中发挥作用。由于乙型肝炎病毒复制过程中释放病毒颗粒进入血液循环系统，因此血清中可以检测到HBV DNA和HBsAg，而且HBV DNA是最直接反映体内病毒复制情况的指标，大蛋白阳性组的HBV DNA平均水平比阴性组高出几十倍，HBsAg平均值也是阴性组的两倍以上，说明大蛋白阳性组的病毒复制活动较强，相应的也导致患者的肝功能损害情况也较严重，大蛋白阳性组的血清ALT水平也明显高于阴性组（P<0.05）。本文中大蛋白阴性组的ALT平均水平接近于正常参考值上限40U/L，说明大蛋白阴性组虽然HBV DNA和HBsAg水平均显示患者被病毒感染，有相当一部分患者肝功能是正常或接近正常的。在本文显示的结果中病毒的复制活跃程度与年龄也有一定关系，大蛋白阳性组的平均年龄要小于大蛋白阴性组，可能是年轻人的免疫功能较强，易于诱发对病毒的免疫清除反应，但本文只是初步探讨，这还有待于进一步的研究。
乙型肝炎病毒的复制活动观察采用HBV DNA检测是最直接的方法，但是病毒核酸的定量检测需要建立符合卫生部要求的临床基因扩增检测实验室，还要购置昂贵的仪器设备，对实验室的环境人员等各方面条件要求较高，在一般的基层医院很难开展。采用酶联免疫法检测乙型肝炎病毒外膜大蛋白，可以反映乙型肝炎病毒复制活跃程度，作为病毒感染后诊断、治疗及预后判断的重要监测指标，而且酶联免疫法检测方法成熟，操作简单，对设备要求不高，在广大基层医院便于开展[4-5]。
参考文献
[1] 骆抗先.乙型肝炎基础和临床.第2版.北京：人民卫生出版社，2001.
[2] Bruss V.Envelopment of the hepatitis B virus nucleocapsid[J].Virus Res，2004，106：199-209.
[3] Lambert C，Mann S，Prange R.Assessment of determinants affecting the dual topology of hepadnaviral large envelope proteins[J].J Gen Virol，2004，85：1221-1225.
[4] 毛小红.乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测的临床意义[J].放射免疫学杂志，2009，22（5）：511-513.
[5] 莫喜明，许允，董存岩，等.乙肝病毒外膜大蛋白检测在病毒复制判定中的意义[J].中国实验诊断学，2009，13（11）：1591-1593.