【摘 要】
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目的拟构建激素敏感性脂肪酶(HSL)基因启动子报告质粒。方法将以C57BL/6小鼠基因组DNA为模板扩增的小鼠HSL基因启动子序列,插入pGL4.10-basic荧光素酶报告质粒多克隆位点区域
【机 构】
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中国医科大学附属第四医院第一肿瘤内科,中国医科大学公共卫生学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(No :81402661)
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目的拟构建激素敏感性脂肪酶(HSL)基因启动子报告质粒。方法将以C57BL/6小鼠基因组DNA为模板扩增的小鼠HSL基因启动子序列,插入pGL4.10-basic荧光素酶报告质粒多克隆位点区域,再经PCR、限制性酶切和测序分析筛选出目标质粒pGL4.10-basic-HSL,采用荧光素酶活性分析评价质粒的转录活性。结果启动子插入片段长度正确,序列与数据库一致;目标报告质粒转入293T细胞后,在过氧化物酶体增殖物激活受体γ作用下具有转录活性,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建
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