槐角黄酮通过调控LncRNA FBXL19-AS1/miR-342-3p通路抑制肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的机制研究

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探讨槐角黄酮对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响并分析其对长链非编码RNA FBXL19-AS1(LncRNA FBXL19-AS1)/微小RNA-342-3p (miR-342-3p)通路的调控机制.采用甲基噻唑基四唑(MTT)法与平板克隆试验检测不同质量浓度(1,5,10 mg·mL-1)的槐角黄酮对肝癌Huh7细胞增殖能力的影响;Transwell小室试验检测槐角黄酮对Huh7细胞迁移及侵袭能力的影响;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测槐角黄酮对Huh7细胞中FBXL19-AS1和miR-342-3p表达水平的影响;双荧光素酶报告试验检测FBXL19-AS1是否靶向miR-342-3p;采用上述方法检测抑制FBXL19-AS1表达或FBXL19-AS1过表达后对Huh7细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;明胶酶谱检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的活性;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞周期蛋白1(cyclinD1),p21,MMP-2,MMP-9蛋白表达量.槐角黄酮可明显抑制Huh7细胞增殖、迁移及侵袭(P<0.05),促进p21蛋白表达(P<0.05),抑制cyclinD1,MMP-2,MMP-9蛋白表达(P<0.05),并可降低MMP-2和MMP-9活性(P<0.05);槐角黄酮处理后Huh7细胞中FBXL19-AS1的表达水平显著降低(P<0.05),miR-342-3p的表达水平显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告试验结果证实FBXL19-AS1靶向抑制miR-342-3p的表达;抑制FBXL19-AS1表达后细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),细胞克隆形成数显著减少(P<0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P<0.05),cyclinD1,MMP-2,MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.05),MMP-2和MMP-9活性显著降低(P<0.05),p21蛋白表达水平显著升高(P<0.05);FBXL19-AS1过表达可逆转槐角黄酮对Huh7细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用.槐角黄酮通过调控LncRNA FBXL19-AS1/miR-342-3p通路抑制肝癌细胞增殖、迁移及侵袭.
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