改进的亚硫酸氢钠测序法检测HepG2 RASSF1A基因CpG岛甲基化状态

来源 :华中科技大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：angeldd

【摘要】

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目的改进亚硫酸氢钠测序法,并检验改进后方法在甲基化检测中的可行性.方法提取人肝癌细胞株HepG2基因组DNA,亚硫酸氢钠化学修饰,针对修饰后Ras相关家族1A基因(RASSF1A)启动子

【作者】

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张莉君王先良孙晞徐顺清

【机构】

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华中科技大学同济医学院公共卫生学院环境医学研究所

【出处】

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华中科技大学学报

【发表日期】

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2004年期

【关键词】

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亚硫酸氢钠测序法甲基化聚合酶链反应 Ras相关家族1A基因

【基金项目】

：

国家自然科学基金;

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目的改进亚硫酸氢钠测序法,并检验改进后方法在甲基化检测中的可行性.方法提取人肝癌细胞株HepG2基因组DNA,亚硫酸氢钠化学修饰,针对修饰后Ras相关家族1A基因(RASSF1A)启动子序列设计特异引物并结合沉降PCR扩增,T-A载体克隆、测序.结果 HepG2细胞RASSF1A基因启动子CpG岛的16个CpG位点均被甲基化.结论改进后亚硫酸氢钠测序法能明显减少非特异性扩增,提高PCR效率,更适于基因甲基化状态的检测.

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