【摘 要】
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目的 建立环介导等恒温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速、特异地检测藻类制品中的产毒微囊藻.方法 以微囊藻毒素(microcystins,MCs)合成基因mcyE基
【机 构】
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广东产品质量监督检验研究院,顺德,528300
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目的 建立环介导等恒温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速、特异地检测藻类制品中的产毒微囊藻.方法 以微囊藻毒素(microcystins,MCs)合成基因mcyE基因为模板设计了1套LAMP引物,分别用LAMP方法和实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法进行特异性和灵敏度试验,并对结果进行比较.对10种实际样品进行LAMP检测,并与超高效液相色谱串联质谱法测定结果进行对比.结果 在特异性试验中,6株产毒微囊藻LAMP反应均检出mcyE基因,12株非产毒微囊藻和其他藻株均未检出mcyE基因,而实时荧光PCR反应结果则出现非特异性扩增.灵敏度试验中,LAMP方法的最低模板浓度为0.005 ng/μL,而实时荧光PCR方法的最低模板浓度为0.5 ng/μL.10种实际样品中均未检出mcyE基因和MC-LR.结论 该方法操作简单、特异性高、灵敏度较好,适用于藻类制品中产毒微囊藻的检测.
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