c-flag-ago3质粒在人293细胞系中的表达及AGO3蛋白复合物的细胞定位

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将c—flag-ago3质粒转入人293细胞系中,使c—flag—ago3基因稳定表达,为进一步研究AGO3蛋白复合物的结构、功能奠定了基础。利用亲和标签flag对目标蛋白进行检测和监测,将已合成的c—flag—ago3质粒和用于对照的质粒si—ago3(能使ago3基因沉默的质粒)导入人293细胞系中,在荧光镜下观察转染效果。RT—PCR法检测基因含量,蛋白印迹法(WB)检测人293细胞表达的flag—ago3,并对其蛋白复合物进行细胞定位。结果显示,c—flag—ago3质粒和si—ago3质粒成功地
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