低温冻存脐血树突状细胞的生物特性研究

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目的考察经低温保存的脐血树突状细胞所表现的生物特性,为树突状细胞的应用提供保存方法.方法取新鲜脐血细胞和脐血细胞培养产生的树突状细胞,加5%二甲基亚砜-6%羟乙基淀粉的保存剂,-80℃冰箱降温,-196℃保存,40℃复温(前者称“冻存脐血”,后者称“树突状细胞”),再用树状突细胞培养增殖法培养,检测:细胞增殖量,台盼蓝拒染回收率,不染色和染色观察,表面抗原,树状突细胞的混合淋巴细胞刺激指数、抗毒-杀灭效应处理率,比较其变化.结果形成树突状细胞的时间冻存脐血培养比新鲜脐血迟,细胞增殖量低,冻存脐血台盼蓝拒染为95.8%.冻存树突状细胞形成贴壁树突样细胞比新鲜树突状细胞迟,细胞数增殖量低,冻存树突状细胞的台盼蓝拒染为88.7%.冻存脐血与新鲜脐血比,冻存树突状细胞与新鲜树突状细胞比,其树突样细胞量、CD1a、CD83、HLA-DR表达低;冻存脐血与新鲜脐血比,冻存树突状细胞与新鲜树突状细胞比,刺激指数、效应处理率均低.结论用5%二甲基亚砜-6%羟乙基淀粉低温保存脐血细胞或经培养增殖的脐血树突状细胞,复温后培养,树突状细胞的生物特性受到了损伤,但仍完整,回收率>85%.
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