目的将高内涵细胞成像增殖检测与胸腺嘧啶核苷（³H-TdR）参入法、四甲基偶氮唑盐（MTT）法和细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法等经典的细胞增殖检测方法进行比较。方法以成纤维样滑膜细胞（FLS）为研究对象,采用常用的增殖刺激剂肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和已知的增殖抑制剂甲氨蝶呤不同浓度处理细胞,观察不同方法检测FLS增殖的敏感性和稳定性。结果³H-TdR参入法和高内涵细胞成像法可检测到1 nmol·L^-1MTX对FLS细胞增殖的明显抑制作用,MTT法和CCK-8法可检测出10 nmol·L^-1MTX对FLS细胞增殖的明显抑制作用。³H-TdR参入法检测得到的数据组内离散程度较大,标准差为均值的32.61%⁶1.36%,MTT法为11.9%¹7.8%,CCK-8法为17.15%³2.88%,高内涵细胞成像法为12.66%²6.54%。结论高内涵细胞成像为一种更准确和稳定的检测细胞增殖的实验方法。