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目的:为进一步了解CIK细胞抗肿瘤和抗病毒的作用机制,开展了CIK细胞因子表达谱的研究工作。
方法:Ficoll分层液法从人外周血分离得到非粘附性淋巴细胞,体外经细胞因子IFN-γ、IL-1β、IL-2及抗CD3单抗诱导增殖分化成CIK细胞。流式细胞术鉴定CIK的表型,MTT法测定效应细胞的细胞毒性。以人GAPDH为参照基因,应用RT-PCR定性和半定量检测在培养的第6、10、20和30天四个时期CIK细胞因子的表达情况。
结果:CD3+CD56+细胞百分率达到80.21%,CIK细胞对人肿瘤细胞株BEL-7404、A549和A375的杀伤率随效靶比的增高而上升,细胞的高效杀伤活力集中在14-21天之间。IFN家族大多成员集中在10-20天之间高表达,培养初期和末期表达都较低;IL家族大都集中在6-10(或20)天时稳定表达,之后略有下调趋势;TNF家族的TNF-β和TRAIL组成性表达且表达水平变化很小或几乎不变。TNF-α主要高表达在第20天时期。TGF-β1则集中在细胞培养的后期表达,个体差异小。
结论:对多种肿瘤细胞有杀伤作用的CIK细胞广泛表达多种类型的细胞因子。