【摘 要】
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目的:探讨牛磺酸上调基因1(TUG1)在肝纤维化中的作用机制.方法:按照文献建立TGF-β1(5 ng/ml)刺激的活化肝星状细胞模型和经典的1％DMN(1 ml/kg/d)致大鼠肝纤维化模型,将肝纤维化大鼠和活化肝星状细胞(HSC)均分为模型对照组、阴性对照组(沉默TUG1阴性对照)、siRNA干扰组(TUG1基因沉默组).实验结束后利用苏木精-伊红(HE)染色检测大鼠肝脏组织病理变化;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、蛋白免疫印记(Western blot)分别测定大鼠肝组织及活化肝星状细胞
【机 构】
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商丘医学高等专科学校,河南 商丘476100
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目的:探讨牛磺酸上调基因1(TUG1)在肝纤维化中的作用机制.方法:按照文献建立TGF-β1(5 ng/ml)刺激的活化肝星状细胞模型和经典的1％DMN(1 ml/kg/d)致大鼠肝纤维化模型,将肝纤维化大鼠和活化肝星状细胞(HSC)均分为模型对照组、阴性对照组(沉默TUG1阴性对照)、siRNA干扰组(TUG1基因沉默组).实验结束后利用苏木精-伊红(HE)染色检测大鼠肝脏组织病理变化;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、蛋白免疫印记(Western blot)分别测定大鼠肝组织及活化肝星状细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TUG1、I型胶原蛋白(col-lagenI)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)、Smad2、Smad3表达水平.结果:肝组织病理学检查显示,沉默TUG1能够明显缓解肝脏纤维化病理改变,Western blot结果显示,沉默TUG1能够显著降低大鼠肝组织和活化肝星状细胞中TUG1、α-SMA、collagenI、MMP-2、TIMP-1、Smad2、Smad3基因与蛋白表达水平(P<0.05).与模型对照组相比,阴性对照组的TUG1、α-SMA的蛋白与基因水平明显升高(P<0.05).与模型对照组和阴性对照组相比,siRNA干扰组中TUG1,α-SMA,collagenI,MMP-2,TIMP-1,Smad2 and Smad3的蛋白和基因水平显著降低(P<0.05),而在模型对照组和阴性对照组中TUG1,α-SMA,collagenI,MMP-2,TIMP-1,Smad2 and Smad3的蛋白和基因表达水平之间差异无显著性.结论:TUG1在肝纤维化组织和活化的肝星状细胞中显著上调,沉默TUG1可能通过抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路改善1％DMN致大鼠肝纤维化病理损伤,降低活化肝星状细胞中纤维化相关蛋白水平,发挥抗肝纤维化的作用.
其他文献
目的:探讨不同剂量核暴露后不同时间对大深度快速上浮脱险致减压病大鼠模型的发病率、死亡率及损伤指标的影响.方法:80只SD雄性大鼠,随机分成空白对照组、脱险对照组和6个干预组(4 Gy辐射后4 h脱险、6Gy辐射后4h脱险、12Gy辐射后4h脱险、4Gy辐射后8h脱险、6Gy辐射后8h脱险、12Gy辐射8h后脱险),每组10只.干预组动物先采用不同剂量γ射线外照射(4、6、12 Gy),再进行大深度快速上浮脱险实验(最大加压深度150 m),分析大鼠肺W/D、脾指数及血浆IL-1β的变化.结果:与脱险对照组
目的:观察在递增负荷运动期间饮用100％枸杞汁对男大学生血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(C)、胰岛素(INS)、胰高血糖素(PG)和血糖(Glu)变化,探讨100％枸杞汁在递增负荷运动期间对机体下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴应激和血糖调节的作用.方法:将28名健康男性大学生随机分为对照组(C组,16人)和实验组(E组,12人),所有受试者进行为期32 d、4个阶段的递增负荷运动,运动期间E组每人每天睡前饮用100 ml 100％枸杞汁.在实验前和每阶段结束后次日晨采用血糖仪测试受试者Glu及E
目的:探讨在脂多糖(LPS)所致细菌脓毒症免疫抑制中树突状细胞(DCs)程序性细胞死亡配体-1(PD-L1)的表达情况及其相关信号通路.方法:细菌脂多糖刺激骨髓来源树突状细胞诱导淋巴细胞免疫抑制模型,实验分为5组:对照组(Con)、脂多糖组(LPS)、2-(4-吗啉基)-8-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮+脂多糖组(LY294002+LPS)、吡咯烷二硫代甲酸铵盐+脂多糖组(PDTC+LPS)和脂多糖+封闭PD-L1组(LPS+αPD-L1).小鼠骨髓来源单核细胞用含粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM
目的:以人胃癌SGC-7901细胞为研究对象,探究桦木酸对其凋亡的影响.方法:将人胃癌SGC-7901细胞分为4组,每组设置3个复孔,对照组未加入桦木酸,而三组实验组分别加入浓度为10 mg/L、20 mg/L及30 mg/L的桦木酸,将各组细胞放入5％的CO2培养箱中培养48 h,激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化;qRT-PCR和Western blot分别检测SGC-7901细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax和Caspase-3在mRNA和蛋白水平的表达.结
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